[发明专利]一种抗D-二聚体单克隆抗体及其制备方法有效
| 申请号： | 201810925413.9 | 申请日： | 2018-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN109053893B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 郁庆明;刘金涛;诸葛鑫 | 申请（专利权）人： | 智享生物（苏州）有限公司 |
| 主分类号： | C07K16/36 | 分类号： | C07K16/36;C12N15/13;C12N5/10;G01N33/68;G01N33/577 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 二聚体 单克隆抗体 及其 制备 方法 | ||
1.培养重组CHO细胞株制备抗D-二聚体单克隆抗体的方法，其特征在于，所述抗D-二聚体单克隆抗体的轻链氨基酸序列如SEQ ID NO.5所示，重链氨基酸序列如SEQ ID NO.6所示；
所述方法是以pCHO 1.0为表达载体，在CHO-S宿主细胞中表达所述抗D-二聚体单克隆抗体；
将种子细胞按（1.0±0.4）×106个/ml的接种密度用Dynamis培养基稀释至3 L细胞培养反应器中，初始培养体积为1 L，设置搅拌转速为250~280 r/min，pH设置为6.95±0.15，通过碳酸氢钠溶液和CO2调节pH；溶解氧设置为40±20%；1~4天培养温度设置为36.5±0.5℃；培养第5天降温至33.5±0.5℃；培养第14天收获；第3、5、7、9、11天用补料培养基进行补料，补料培养基为Feed C Plus，补料体积为初始培养体积的4%。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，用Dynamis培养基将重组CHO细胞按0.6×106个/mL的接种密度稀释至3 L细胞培养反应器中，初始培养体积为1 L；设置搅拌转速为250 r/min；pH设置为7.00，DeadBand设置为0.10，通过碳酸氢钠溶液和CO2调节pH；溶解氧设置为40%，1~4天培养温度设置为36.5℃；培养第5天降温至33.0℃；培养第14天收获；第3、5、7、9、11天用补料培养基进行补料，补料培养基为Feed C Plus，补料体积为初始培养体积的4%。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，培养结束后，对培养上清首先进行深层过滤去除细胞，将澄清收获液通过亲和纯化分离得到抗D-二聚体单克隆抗体。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于智享生物（苏州）有限公司，未经智享生物（苏州）有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810925413.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
