[发明专利]一种协同链黑菌素制备抗肿瘤纳米组合药物的方法

说明书

本发明的一种协同链黑菌素制备抗肿瘤纳米组合药物的方法，将TEMPOL与STN一起镶嵌在MSNs中形成一种由链黑菌素和氮氧自由基组合的纳米抗肿瘤药物，该纳米材料可以很好的容纳链黑菌素活性分子，起到靶向运输，使其能够在最大程度上减小毒副作用；同时，通过氮氧自由基再次对链黑菌素进行解毒；另外，利用来那度胺分子特异性地修饰到纳米分子表面，与整合素结合靶向输送组合药物到肿瘤细胞，起到高效利用链黑菌素和消除其对他正常细胞的毒副作用的效果。

技术领域

本发明属于医药制造领域，具体涉及一种协同链黑菌素制备抗肿瘤纳米组合药物的方法。

背景技术

链黑菌素(Streptonigrin，STN)是由绒毛链霉菌所产生的抗肿瘤抗生素，呈咖啡色至黑色片状结晶，微溶于水、乙醇、乙酸乙酯、氯仿，溶于二氧六环及吡啶。STN可选择性地抑制DNA合成，一个分子的STN可与2000个分子的脱氧核苷酸稳定地结合，并能使肿瘤细胞染色体继裂，使已形成的DNA降解。因此它具有广谱的抗肿瘤活性，特别是对恶性淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病和慢性粒细胞白血病具有较好的临床疗效。在STN分子中具有氨基醌的结构，有利于保持其生物活性。STN在抗癌活性上比目前临床使用的抗癌药物依托泊苷和替尼泊苷高很多，但由于其较强的毒性曾一度停止使用，临床表现为有很强的骨髓抑制作用。

发明内容

本发明的目的是提供一种协同链黑菌素制备抗肿瘤纳米组合药物的方法，制备的产品在利用链黑菌素高效治疗肿瘤的同时，减少对其它正常细胞的毒副作用，更好的发挥链黑菌素在肿瘤治疗方面的疗效。

本发明采取的技术方案为：

一种协同链黑菌素制备抗肿瘤纳米组合药物的方法，包括以下步骤：

步骤一、载体的制备

(1)MSNs的制备

首先利用间苯二酚-甲醛树脂、福尔马林水溶液和NaOH水溶液制得酚醛树脂；然后将三嵌段共聚物PluronicF127(模板剂)溶解于蒸馏水中得到浓度为2％～10％的模板剂水溶液，并将pH调至6～8；在调节了pH值的模板剂水溶液中加入制得的酚醛树脂，在60℃下以320rpm搅拌1.5～2h，然后加入40mL水，反应12～14小时；将得到的溶液用3倍体积的水稀释，再转移到高压釜中，115℃下加热24小时，最后将所得产物进行离心收集，并用蒸馏水洗涤后干燥得到孔径为3～5nm的MSNs；

(2)双层介孔的碳-氧化硅复合核-壳结构纳米球的合成

采用法在MSNs上涂覆一层无孔二氧化硅壳(nSiO₂)，然后采用表面活性剂辅助的溶胶-凝胶法在氨溶液中涂覆一层介孔二氧化硅，最后，用弱碱性溶液选择性蚀刻中间无定形二氧化硅层，获得均匀的棘状核-壳纳米结构，在600℃下，N ₂气中煅烧，使内部聚合物芯碳化，得到纳米球载体；

步骤二、载体的表面修饰

(1)载体的表面氧化

用高浓度强酸(体积比为3∶1的H₂SO4和HNO₃混酸)处理纳米球载体，并用水洗涤至中性，再真空干燥得氧化载体，然后通过二亚胺活化的酰胺化反应将聚乙烯亚胺(PEI)共价键接合到氧化后的纳米球载体上；

(2)连接来那度胺分子

准备两份二甲基亚砜(DMSO)溶液，在其中一份中混合来那度胺，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐和N-羟基琥珀酰亚胺，25℃下搅拌0.5小时形成溶液A，同时，将连接了PEI的氧化载体分子分散在另一份DMSO中形成溶液B，然后，将溶液B加入到溶液A中，搅拌，再将得到的固体离心并依次用DMSO、水和乙醇洗涤，最后在60℃下真空干燥12小时；

步骤三、抗肿瘤组合药物的上载