[发明专利]一种用于环介导等温扩增的试剂及其试剂盒和应用在审
| 申请号： | 201810922940.4 | 申请日： | 2018-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN109161582A | 公开（公告）日： | 2019-01-08 |
| 发明（设计）人： | 关明;曹国君 | 申请（专利权）人： | 关明;曹国君 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 上海申新律师事务所 31272 | 代理人： | 俞涤炯 |
| 地址： | 200333 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 试剂盒 环介导等温扩增 氯化四甲基铵 二硫苏糖醇 纳米颗粒 肽牛血清 海藻糖 检测 环介导等温扩增反应 应用 成本问题 进口试剂 实验需求 灵敏度 指示剂 | ||
1.一种用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，包括纳米颗粒、二硫苏糖醇、肽牛血清、氯化四甲基铵、海藻糖中的至少一种。
2.根据权利要求1所述的用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，所述纳米颗粒的材质包括金、银、二氧化硅、聚苯乙烯或石墨烯。
3.根据权利要求权利要求1所述的用于环介导等温扩增的试剂，其特征在于，所述纳米材颗粒的表面带正电荷或不带电荷，其直径为0-1000nm。
4.一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，含有权利要求1～3中任一项所述的用于环介导等温扩增的试剂。
5.根据权利要求4所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，还包括：10×恒温buffer、dNTP混合物、MgSO4、Bst DNA聚合酶以及指示剂。
6.根据权利要求5所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，在环介导等温扩增反应体系中各组分的终浓度如下：纳米颗粒0-10mg/mL；二硫苏糖醇0-10M；肽牛血清0-10g/mL；氯化四甲基铵0-100mM；海藻糖0-50mM；dNTP混合物1.0-3.0mM；MgSO4 4-10mM；Bst DNA聚合酶0.1-0.5U/μL。
7.根据权利要求6所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，在环介导等温扩增反应体系中各组分的终浓度如下：dNTP混合物1.5mM；MgSO4 6mM；Bst DNA聚合酶0.32U/μL；纳米颗粒0.012mg/mL；二硫苏糖醇0.08M；肽牛血清0.01g/mL；氯化四甲基铵2mM；海藻糖3.2mM。
8.根据权利要求6所述的一种用于环介导等温扩增的试剂盒，其特征在于，所述环介导等温扩增反应体系的扩增条件为：60～68℃扩增20-60min。
9.一种如权利要求5～8中任一项所述的试剂盒在LAMP扩增中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述应用为用于CALR-2型突变的检测，在所述应用中使用如SEQ ID NO：2～SEQ ID NO：7所示序列的引物组合物。
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