[发明专利]一种利用HPLC测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法

说明书

本发明公开了一种利用HPLC法测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法，包括对照品溶液的制备、色谱条件及标准曲线的确定、供试品溶液的制备和测定等步骤。本发明利用HPLC方法能更有效的控制喉咽清颗粒的质量，保证其疗效。

技术领域

本发明属于药品检测技术领域，具体涉及一种利用HPLC测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法。

背景技术

喉咽清颗粒由土牛膝、马兰草、车前草、天名精四味药材加入蔗糖和糊精制成，具有清热解毒，利咽止痛的功效，用于肺胃实热所致的咽部肿痛，发热，口渴，便秘以及扁桃体炎、急性咽炎见于上述证候者。现有技术中通过薄层色谱法对喉咽清颗粒中的齐墩果酸进行质量控制来控制喉咽清颗粒的质量，该方法稳定性和精确度等已不能满足现有的技术要求，而尚没有用高效液相色谱法控制喉咽清颗粒质量的报道，因此，为了更加有效的控制喉咽清颗粒的质量，保证其疗效，寻找一种喉咽清颗粒中齐墩果酸的HPLC测定方法具有重要意义。

发明内容

本发明旨在克服现有技术的不足，提供一种利用HPLC测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法。

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

所述利用HPLC测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品，精密称定后，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸0.25mg的溶液，即得对照品溶液；

(2)色谱条件及标准曲线的确定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：甲醇：体积百分比浓度为0.5％的冰醋酸按体积比45∶45∶10作为流动相，将梯度稀释的对照品溶液注入液相色谱仪，于波长210nm条件下测定；以对照品溶液稀释后浓度为横坐标x，以峰面积积分值为纵坐标y，得标准曲线：y＝6064.3x+37429，R2＝0.9997；其中，横坐标x的单位为μg/mL，纵坐标y的单位为AU；

(3)供试品溶液的制备：取喉咽清颗粒，经研细、醇沉、水解、萃取后，即得供试品溶液；

(4)测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：甲醇：0.5％(指体积百分比浓度)冰醋酸按体积比45∶45∶10作为流动相，将供试品溶液注入液相色谱仪，于波长210nm条件下测定，计算即得喉咽清颗粒中齐墩果酸的含量。

优选地，步骤(2)中，测定对照品溶液是，理论板数按齐墩果酸计算应不低于4000。

优选地，步骤(3)中，供试品溶液的制备具体过程如下：取喉咽清颗粒，研细，取8g，精密称定，置烧杯中，加沸水50ml使溶解，放冷，转移至100ml量瓶中，用少量无水乙醇洗涤烧杯，洗液并入量瓶中，加无水乙醇至刻度，边加边振摇，静置30min，在转速为8000r/min条件下离心5min，精密量取上清液50ml，加盐酸7ml，加热回流30分钟，冷却，转移至分液漏斗中，用60～90℃的石油醚振摇提取6次，每次25ml，合并石油醚液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

本发明利用HPLC方法能更有效的控制喉咽清颗粒的质量，保证其疗效。

附图说明

图1为齐墩果酸对照品溶液色谱图；

图2为流动相：乙腈-甲醇-0.5％冰醋酸(45∶45∶10)色谱图；

图3为流动相：乙腈-甲醇-0.5％醋酸铵溶液(67∶12∶21)色谱图；

图4为齐墩果酸标准曲线图；

图5为齐墩果酸对照品色谱图；

图6为喉咽清颗粒(批号：20170203)色谱图；

图7为阴性对照色谱图。

具体实施方式