[发明专利]一种利用HPLC测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法

权利要求书

1.一种利用HPLC法测定喉咽清颗粒中齐墩果酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备：取齐墩果酸对照品，精密称定后，加甲醇制成每1ml含齐墩果酸0.25mg的溶液，即得对照品溶液；

(2)色谱条件及标准曲线的确定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：甲醇：0.5％冰醋酸按体积比45∶45∶10作为流动相，将梯度稀释的对照品溶液注入液相色谱仪，于波长210nm条件下测定；以对照品溶液浓度为横坐标x，以峰面积积分值为纵坐标y，得标准曲线：y＝6064.3x+37429，R2＝0.9997；其中，横坐标x的单位为μg/mL，纵坐标y的单位为AU；

(3)供试品溶液的制备：取喉咽清颗粒，经研细、醇沉、水解、萃取后，即得供试品溶液；

(4)测定：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈：甲醇：体积百分比浓度为0.5％的冰醋酸按体积比45∶45∶10作为流动相，将供试品溶液注入液相色谱仪，于波长210nm条件下测定，计算即得喉咽清颗粒中齐墩果酸的含量;

供试品溶液的制备具体过程如下：取喉咽清颗粒，研细，取8g，精密称定，置烧杯中，加沸水50ml使溶解，放冷，转移至100ml量瓶中，用少量无水乙醇洗涤烧杯，洗液并入量瓶中，加无水乙醇至刻度，边加边振摇，静置30min，在转速为8000r/min条件下离心5min，精密量取上清液50ml，加盐酸7ml，加热回流30分钟，冷却，转移至分液漏斗中，60～90℃的石油醚振摇提取6次，每次25ml，合并石油醚液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，测定对照品溶液时 ，理论板数按齐墩果酸计算应不低于4000。