[发明专利]海带配子体DNA溶液的制备方法及性别鉴定方法有效
| 申请号： | 201810915328.4 | 申请日： | 2018-08-13 |
| 公开（公告）号： | CN108531478B | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 刘延岭;李言;姜黎明;彭捷;王利芹;赵聚萍;武瑞娜;李晓捷;潘金华;田萍萍 | 申请（专利权）人： | 山东东方海洋科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10;C12Q1/6806;C12Q1/6879 |
| 代理公司： | 烟台双联专利事务所(普通合伙) 37225 | 代理人： | 梁翠荣 |
| 地址： | 264003 山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 海带配子体 性别鉴定 制备 灭菌 海带雌配子体 海带雄配子体 雄性特异引物 分子试剂 扩增效率 去离子水 室温静置 特异引物 研磨 沸水浴 离心管 上清液 双引物 混杂 品系 混淆 开发 检测 | ||
【权利要求书】：
1.一种海带配子体的性别鉴定方法，其特征在于：以海带配子体DNA溶液为PCR模板，利用雌性特异引物HFM4和雄性特异引物Msj68-16-3进行一轮双引物PCR扩增，用于多个海带品种或者品系配子体的性别鉴定及混杂现象确认；
其中，雄性特异引物Msj68-16-3序列：上游引物 5’-GTGGCCAGCCTACACTCACT- 3’
下游引物 5’-CCTTCTCGTAGCGTTCCTTG- 3’；
雌性特异引物HFM4序列：上游引物 5’-CATGCCGCGACATACTGATA- 3’
下游引物 5’-ACCCTTCAGGGGCTCAAGTA- 3’；
其中，所述的海带配子体DNA溶液按照以下步骤制备：取鲜重质量1mg~30mg的海带配子体于1.5 mL灭菌离心管中，加入500μL灭菌的去离子水，充分研磨，沸水浴5~40分钟，室温静置沉淀20分钟以上，将上清液转移到灭菌离心管中。
2.如权利要求1所述的海带配子体的性别鉴定方法，其特征在于：海带配子体DNA溶液制备中，海带配子体的鲜重质量15mg~30mg；沸水浴20分钟；室温静置沉淀30分钟。
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