[发明专利]与黄瓜单性结实基因紧密连锁的InDel标记及其应用与引物

权利要求书

1.与黄瓜单性结实基因紧密连锁的InDel标记，将InDel标记命名为Chr7InDel01；Chr7InDel01位于黄瓜第7号染色体4,108,811处，在双亲的Chr7InDel01处，父本即弱单性结实性黄瓜品系有插入如下碱基：AAAATATTTACCAAAATTT，而母本即强单性结实性黄瓜品系在此处的碱基仅为A。

2.一组用于检测权利要求1所述与黄瓜单性结实基因相关的InDel标记的引物对，其碱基序列为：

上游引物5′-TGTTGTTGTTGCTATATGGGTAATG-3′，

反向引物5′-CGATAATGACGTGGGTTGTG-3′。

3.权利要求1所述的Chr7InDel01在黄瓜强/弱单性结实性品种鉴定中的应用：Chr7InDel01位于黄瓜第7号染色体4,108,811处；

若在Chr7InDel01处有插入碱基‘AAAATATTTACCAAAATTT’的黄瓜品种，为弱单性结实性品种；

若在Chr7InDel01处碱基仅为A的黄瓜品种，则为弱单性结实性品种。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，包括以下步骤：

（1）提取待检测黄瓜基因组DNA；

（2）以待检测黄瓜基因组DNA为模板，利用权利要求2所述引物对，进行PCR扩增反应，（3）经上述PCR扩增后进行电泳检测，如条带与父本‘ZK’一致，则为弱单性结实性黄瓜品系；如条带与母本‘BY’一致，则为强单性结实性黄瓜品系。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR扩增反应体系共10微升：1微升10 ×上样缓冲液loading buffer，0.2微升dNTP，0.5微升上游引物，0.5 微升下游引物，0.1微升rTaq酶，6.7微升ddH2O，1微升DNA。

6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述PCR反应程序为：95℃预变性3min；94℃变性45s，68-58℃退火1min，每个循环降低2℃，72℃延伸1min，共6个循环；94℃变性30s，58-50℃退火1min，每个循环降低1℃，72℃延伸1min，共8个循环；72℃延伸1min；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸1min，共20个循环；72℃延伸7min；4℃保存。

7.权利要求1所述的InDel及衍生的引物在黄瓜单性结实分子标记辅助育种中的应用。