[发明专利]一种高效提取干细胞因子的方法在审
| 申请号： | 201810903864.2 | 申请日： | 2018-08-09 |
| 公开（公告）号： | CN110818788A | 公开（公告）日： | 2020-02-21 |
| 发明（设计）人： | 高飞 | 申请（专利权）人： | 苏州迈斯特细胞生物技术有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/475 | 分类号： | C07K14/475;C12N5/074 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 215000 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高效 提取 干细胞 因子 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种高效提取干细胞因子的方法，其特征在于其步骤为：
（1）、将人工诱导多能性干细胞放置在直经为8.55厘米的细胞培养皿内培养，使得人工诱导多能性干细胞覆盖掉细胞培养皿底面积的85%；
（2）、将步骤（1）所述细胞培养皿中的培养基吸出，使用1-3毫升磷酸盐缓冲液（PBS）对细胞培养皿进行清洗，然后将磷酸盐缓冲液吸出；
（3）、向细胞培养皿中加入0.5-1毫升细胞分裂素（CTK）后摇均匀，常温下静止30-120秒，在此期间，至少拍打细胞培养皿一次；
（4）、在显微镜下观察，待基底细胞剥离后，加入3毫升PBS进行清洗，然后将PBS吸出，重复上述加入PBS操作4次，在显微镜下观察，确保细胞剥离液完全被洗净，然后将PBS彻底吸出；
（5）、向细胞培养皿中加入人工诱导多能性干细胞培养液2毫升，然后用细胞刷将人工诱导多能性干细胞刷离培养皿；
（6）、使用1毫米长枪头将步骤（5）中制备出的人工诱导多能性干细胞吸入接着吹出，反复吹吸6次，在显微镜下观察，将大小在65微米内的人工诱导多能性干细胞块即完成了高效提取干细胞因子。
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