[发明专利]用高效液相色谱检测替格瑞洛有关物质的方法

说明书

本发明公开了一种用高效液相色谱法检测替格瑞洛及其有关物质的方法。该方法较进口注册标准和之前的文献方法相比，可有效将替格瑞洛及其有关物质(即杂质C与杂质N,杂质M与杂质G,杂质M与替格瑞洛，杂质G与替格瑞洛主峰)分离，从而实现了替格瑞洛及其杂质的有效检测，保证了替格瑞洛的质量控制。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种用高效液相色谱检测替格瑞洛有关物质的方法。

背景技术

替格瑞洛片，用于急性冠脉综合征（不稳定性心绞痛、非ST段抬高心肌梗死或ST段抬高心肌梗死）患者，包括接受药物治疗和经皮冠状动脉介入（PCI）治疗的患者，降低血栓性心血管事件的发生率。其原料药替格瑞洛是一种新型的环戊基三唑嘧啶类（CPTP）口服抗血小板药物。替格瑞洛为非前体药，无须经肝脏代谢激活即可直接起效，与P2Y12 ADP受体可逆性结合。PLATO研究结果显示，替格瑞洛治疗12个月在不增加主要出血的情况下，较氯吡格雷进一步显著降低ACS患者的心血管死亡/心肌梗死/卒中复合终点事件风险达16%，同时显著降低心血管死亡达21%。替格瑞洛片是由英国阿斯利康(AstraZeneca) 制药公司研制开发，于2011 年7 月获美国FDA 批准上市，商品名为Brilinta。

替格瑞洛由于合成过程产生的杂质较多，可能产生的杂质包括关键起始物料、残留中间产品等多种杂质，而且替格瑞洛分子结构中有5个手性中心，杂质不易完全分离。目前关于替格瑞洛有关物质检测方法有替格瑞洛片的进口注册标准和文献方法，但由于原料药合成路线，工艺不同，采用进口注册标准和文献方法对其杂质进行控制时，部分杂质分离度不符合要求，达不到基线分离，不等对其进行有效的控制。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效液相色谱检测替格瑞洛及其有关物质的方法。该方法较进口注册标准和之前的文献方法相比，可有效将替格瑞洛及其有关物质( 即杂质) 分离，从而实现了替格瑞洛及其杂质的有效检测，保证了替格瑞洛的质量控制。

在研究过程中，本发明发现，因为替格瑞洛含有多个手性中心，采用替格瑞洛片进口注册标准对其杂质进行研究时，杂质G和杂质M分离度不够，峰型较差，出现裂峰现象；采用文献报道的方法对其杂质进行控制时，由于杂质C含有手性中心，和杂质N达不到基线分离，换用不同柱子时，原料药主峰前后的杂质G和M分离度不符合要求且峰型较差，干扰对其本身质量的评估，造成检测结果不准确，数据不可靠。经过实验筛选，本发明最终采用高效液相色谱法检测替格瑞洛有关物质，以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，用水溶液（pH3.0）和乙腈为流动相，采用梯度洗脱程序测定，使其有关物质得到有效分离，该方法流动相配置简单，并且重现性好。

上述发明的方法，色谱柱优先选择C18柱，规格为4.6×250mm，5um，其中色谱柱的温度为25~35℃，优先选择30℃，用水溶液和乙腈作为流动相，所述水溶液的pH值范围为2.8~3.2，优先选用磷酸调节pH值为3.0，以紫外检测器作为检测器，所述紫外检测器的检测波长为250~260nm，优先选择波长为255nm。