[发明专利]游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒及其制备方法和使用方法

说明书

本发明涉及一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒及其制备方法和使用方法，涉及免疫分析医学技术领域。本发明的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒包括校准品、R1试剂、R2试剂、R3试剂和质控品。与现有酶促发光体系相比，本发明不需要酶标记，不会引入外来大分子影响抗原抗体结合；不需要发光底物，减少反应流程；对环境温度变化不敏感。本发明提供的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒具有灵敏度高，线性范围宽，检测时间短，稳定性好等特点，缩短了检测时间，为急诊患者节省宝贵时间，可为临床诊断提供更为灵敏、特异、快速的体外诊断试剂。

技术领域

本发明涉及免疫分析医学技术领域，具体涉及一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒及其制备方法和使用方法。

背景技术

近年来标记免疫分析技术的研究和应用发展迅速，已广泛应用于生物医学基础理论研究以及临床体外诊断等领域。主要技术有：放射免疫技术、酶免疫分析和化学发光免疫分析技术。其中放射免疫技术及酶免疫分析技术存在灵敏度低，线性范围窄，且自动化程度低等缺点。化学发光是建立在酶联免疫分析技术基础上发展起来的一种免疫检测技术，具有灵敏度高、检测线性范围宽、稳定性好、自动化程度高等优势。基于以上优势，化学发光免疫分析技术成为目前应用最为广泛的免疫分析技术。

化学发光免疫分析技术是用抗原抗体结合的原理、不同的发光底物进行分析的检测方法。根据发光底物的不同可分为酶促间接化学发光、电化学发光及直接化学发光。其中，酶促间接化学发光通常使用酶标记抗体，抗原抗体形成复合物后加入发光底物。该方法化学发光底物为辉光型持续发光，发光信号易受影响。用于标记的酶易受样本中重金属离子及温度影响，同时试剂稳定性受到酶的稳定性制约。由于标记物为蛋白质大分子物质，标记物的增加提高了抗原抗体间反应的空间位阻效应。

电化学发光免疫分析是以电化学发光剂三联吡锭钌标记抗体，以三丙胺为电子供体在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反应。包括电化学和化学发光两个过程。该方法对环境因素和其他非特异反应过于敏感，对于血清样本中的金属离子及EDTA等抗凝剂、防腐剂的金属螯合物过于敏感。同时反应副产品的沉积也存在潜在的干扰。该方法虽然灵敏度高但对于环境及仪器的要求极高，提高了试剂检测成本。

发明内容

本发明要解决现有化学发光免疫分析技术所用化学发光试剂中存在的对环境敏感、易受干扰、灵敏度差、检测时间长的技术问题，提供一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒及其制备方法和使用方法。本发明的检测试剂盒具有灵敏度高，线性范围广，稳定性好，检测时间短的优点，适于广泛的推广。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案具体如下：

一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒，包括校准品、 R1试剂、R2试剂、R3试剂和质控品；

所述R1试剂为包被有链霉亲和素的磁珠溶液；

所述R2试剂为用HEPES缓冲液稀释的吖啶酯标记的游离β-HCG抗体溶液；

所述R3试剂为用HEPES缓冲液稀释的生物素标记的游离β-HCG抗体溶液。

在上述技术方案中，所述包被有链霉亲和素的磁珠溶液的磁珠浓度为 0.05％-0.1％。

在上述技术方案中，所述吖啶酯标记的游离β-HCG抗体溶液中的游离β-HCG 抗体和吖啶酯的摩尔比为1:3-1:15。

在上述技术方案中，所述生物素标记的游离β-HCG抗体溶液中的游离β-HCG 抗体和生物素的摩尔比1:3-1:15。

一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：

1)以纯品β-HCG抗原配制校准品；

2)以纯品β-HCG抗原配制质控品；