[发明专利]游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒及其制备方法和使用方法

权利要求书

1.一种游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒，其特征在于，包括校准品、R1试剂、R2试剂、R3试剂和质控品；

所述R1试剂为包被有链霉亲和素的磁珠溶液；

所述R2试剂为用HEPES缓冲液稀释的吖啶酯标记的游离β-HCG抗体溶液；

所述R3试剂为用HEPES缓冲液稀释的生物素标记的游离β-HCG抗体溶液。

2.根据权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述包被有链霉亲和素的磁珠溶液的磁珠浓度为0.05％-0.1％。

3.根据权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述吖啶酯标记的游离β-HCG抗体溶液中的游离β-HCG抗体和吖啶酯的摩尔比为1:3-1:15。

4.根据权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述生物素标记的游离β-HCG抗体溶液中的游离β-HCG抗体和生物素的摩尔比1:3-1:15。

5.一种权利要求1所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)以纯品β-HCG抗原配制校准品；

2)以纯品β-HCG抗原配制质控品；

3)R1试剂制备：

用磁珠稀释缓冲液将链霉亲和素磁珠稀释后得到包被有链霉亲和素的磁珠溶液，即为R1试剂；

4)R2试剂制备：

使用超滤离心管将游离β-HCG抗体缓冲液置换为PBS，加入吖啶酯，充分混匀，室温放置2-4小时后，AKTA蛋白纯化仪纯化标记游离β-HCG抗体，将收集到的吖啶酯标记的游离β-HCG抗体用HEPES缓冲液稀释，即为R2试剂；

5)R3试剂：

使用超滤离心管将游离β-HCG抗体缓冲液置换为PBS，加入生物素，充分混匀，室温放置2-4小时后，AKTA蛋白纯化仪纯化标记游离β-HCG抗体，将收集到的生物素标记的游离β-HCG抗体用HEPES缓冲液稀释，即为R3试剂；

6)分装上述校准品、质控品、R1试剂、R2试剂和R3试剂，组装为成品。

6.根据权利要求5所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤3)中配制的包被有链霉亲和素的磁珠溶液的磁珠浓度为0.05％-0.1％。

7.根据权利要求5所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤4)中所述游离β-HCG抗体与所述吖啶酯的摩尔比为1:3-1:15。

8.根据权利要求5所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤5)中所述游离β-HCG抗体与所述生物素的摩尔比为1:3-1:15。

9.根据权利要求5所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，步骤4)和步骤5)中所述的HEPES缓冲液的pH值均为6-8，所述的R2和R3试剂的浓度均为1-3μg/mL。

10.一种权利要求1-4任意一项所述的游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位化学发光检测试剂盒的使用方法，包括以下步骤：

将待测样本与R2试剂孵育5min，加入R3及R1试剂继续孵育5min，洗涤，加入激发液记录相对发光强度。