[发明专利]一种口蹄疫多型表位肽、疫苗及其应用

权利要求书

1.一种口蹄疫多型表位肽，其特征在于，所述表位肽是以核苷酸序列为SEQ ID NO.9的瑞士乳杆菌S层蛋白(T-8)基因为模板，设计引物，将O、A及Asia I3型FMDV的VP1特定表位基因嵌入到所述S层蛋白自我组装区域，再连接表达载体pGEX-4T-3，并转化到大肠杆菌BL21中进行表达，表达产物用SDS-PAGE鉴定，获得口蹄疫多型表位肽，其氨基酸序列为SEQ IDNO.10。

2.权利要求1所述的一种口蹄疫多型表位肽，其特征在于，所述构建方法中设计的引物：

引物对1的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.1，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.2；

引物对2的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.3，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.4；

引物对3的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.5，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.6；

引物对4的上游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.7，下游引物核苷酸序列为SEQ ID NO.8。

3.如权利要求2所述的一种口蹄疫多型表位肽，其特征在于，所述口蹄疫多型表位肽的构建方法具体包括以下步骤：

(1)以所述S层蛋白(T-8)核酸为模板，通过所述引物对1进行PCR扩增得到扩增产物1；利用引物对2进行PCR扩增得到扩增产物2；将所述扩增产物1和所述扩增产物2的混合物作为模板，利用所述引物对1的上游引物和所述引物对2的下游引物作为新引物对进行PCR扩增得到扩增产物3；

(2)以所述S层蛋白(T-8)核酸为模板，通过所述引物对2的上游引物和所述引物对3的下游引物作为引物对进行PCR扩增得到扩增产物5；以所述扩增产物3为模板，利用所述引物对1的上游引物和所述引物对2的下游引物作为引物对进行PCR扩增得到扩增产物4；以所述扩增产物5和所述扩增产物4的混合物为模板，利用所述引物对1的上游引物和所述引物对3的下游引物作为新引物对进行PCR扩增得到扩增产物6；

(3)以所述S层蛋白(T-8)核酸为模板，利用所述引物对4进行PCR扩增得到扩增产物8；以所述扩增产物6为模板，利用所述引物对1的上游引物和所述引物对3的下游引物作为引物对进行PCR扩增得到扩增产物7；以所述扩增产物7和所述扩增产物8的混合物为模板，利用所述引物对1的上游引物和所述引物对4的下游引物作为新引物对进行PCR扩增得到扩增产物9，所述扩增产物9即为口蹄疫多型表位肽。

4.如权利要求3所述一种口蹄疫多型表位肽，其特征在于，所述扩增产物1和所述扩增产物2的混合摩尔比为1:1；所述扩增产物5和所述扩增产物4的混合摩尔比为1:1；所述扩增产物7和所述扩增产物8的混合摩尔比为1:1。

5.一种疫苗，其特征在于，所述疫苗包含权利要求1-4任一项所述的口蹄疫多型表位肽。

6.权利要求1-4任一项所述的一种口蹄疫多型表位肽在制备预防或治疗口蹄疫药物中的应用。