[发明专利]一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基及方法

权利要求书

1.一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基，其特征在于，由种子萌发和原球茎诱导培养基、原球茎增殖和丛生芽诱导培养基以及生根壮苗培养基组成，其中，

所述种子萌发和原球茎诱导培养基由MS基本培养基、0.5-2.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA和20g/L的蔗糖组成；

所述原球茎增殖和丛生芽诱导培养基由MS基本培养基、1.0-4.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、20g/L的蔗糖和100g/L的马铃薯泥组成；

所述生根壮苗培养基由MS基本培养基、1.0-4.0mg/L的6-BA、0.5mg/L的KT、0.5mg/L的NAA、100g/L的香蕉泥、30g/L的蔗糖和1.0g/L的活性炭组成。

2.根据权利要求1所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基，其特征在于，所述种子萌发和原球茎诱导培养基、所述原球茎增殖和丛生芽诱导培养基以及所述生根壮苗培养基的pH值均为5.8。

3.一种利用权利要求1或2所述培养基使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1：无菌播种及原球茎诱导培养

将成熟未开裂的翅萼石斛蒴果消毒后，取出种子，均匀播种于种子萌发和原球茎诱导培养基中，先进行暗培养，待种子转绿后再进行光培养，待种子萌发后，得到原球茎；

步骤2：原球茎增殖和丛生芽诱导培养

将步骤1得到的原球茎，均匀转接到原球茎增殖和丛生芽诱导培养基中，进行光培养，待原球茎增殖后，诱导得到丛生芽；

步骤3：丛生芽生根壮苗培养

当步骤2得到的丛生芽长出2-3片叶子、高2-3cm时，均匀转接到生根壮苗培养基中，进行光培养，得到生根试管苗；

步骤4：移栽驯化

于春季3-4月，将步骤3得到的生根试管苗，炼苗15-30d天后，洗净根部，移栽到移栽基质中，再置于塑料大棚中，浇水、保湿至成苗、出圃，即得到翅萼石斛种苗。

4.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤1中，所述翅萼石斛蒴果采自广西植物研究所兰花种质圃，为当年人工自交授粉结实的成熟未开裂蒴果。

5.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤1中，所述消毒的具体步骤为：先用洗洁精清洗翅萼石斛蒴果的表面，再用自来水冲洗至少30min，然后用75％v/v酒精浸泡1min，接着用无菌水冲洗1次，再用0.1％的升汞浸泡15-30min，然后用无菌水冲洗至少5次；所述暗培养的温度为25±2℃，时间为20-30d。

6.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤2中，所述原球茎的接种量为每个培养瓶接种150-200个原球茎，所述培养瓶的容量为630mL，每个培养瓶中放有100mL原球茎增殖和丛生芽诱导培养基。

7.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤3中，所述丛生芽的接种量为每个培养瓶接种15-20个丛生芽，所述培养瓶的容量为630mL，每个培养瓶中放有100mL生根壮苗培养基。

8.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤1、步骤2和步骤3中，所述光培养的温度均为25±2℃，光照强度均为1500-2000lux，光周期均为12h/d，光照时间分别为30-50d、45-60d和80-120d。

9.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤4中，所述炼苗的条件为：以散光为主，光照强度为3000-4000lux,温度为15-25℃，湿度为70-80％；所述移栽基质经甲基托布津粉剂600倍稀释液消毒处理，所述移栽基质为水苔。

10.根据权利要求3所述的一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，其特征在于，步骤4中，所述塑料大棚在夏季用70％遮阳网进行遮阴。