[发明专利]一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基及方法

说明书

本发明公开了一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基及方法，属于植物生物技术领域。所述使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基，由种子萌发和原球茎诱导培养基、原球茎增殖和丛生芽诱导培养基以及生根壮苗培养基组成。本发明还公开了一种利用上述培养基使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的方法，包括如下步骤：步骤1：无菌播种及原球茎诱导培养；步骤2：原球茎增殖和丛生芽诱导培养；步骤3：丛生芽生根壮苗培养；步骤4：移栽驯化。本发明提高了移栽成活率，快速获得大量翅萼石斛的种苗，克服了常规分株繁殖慢以及自然繁殖难等问题。

技术领域

本发明涉及一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基及方法，属于植物生物技术领域。

背景技术

翅萼石斛(Dendrobium cariniferum)是一种喜阴凉的多年生兰科石斛(Dendrobium)草本植物，产自云南南部至西南部，生于海拔1100-1700米的山地林中树干上。翅萼石斛具有较高的观赏价值，花姿优雅，玲珑可爱，花色鲜艳，具有橘子香气味，也是杂交育种的重要亲本之一。此外，翅萼石斛还具有较高的经济价值，其含有34种化合物，为烷烃类和脂类。

然而，翅萼石斛并没有被中国药典收载，但民间常作为石斛药用品种广泛使用，特别是云南等西南地区，常用作药用石斛利用，致使目前野生资源数量剧减。众所周知，石斛类兰花传统分株繁殖种苗速度很慢，不能满足市场需求，近年来，研究人员开展了石斛属多个种的组培快繁种苗的技术，可以利用茎尖或茎段为外植体研究了组培快繁技术，也有研究无菌播种快繁种苗的技术。但是，石斛属是兰科第二大属，有1500多个野生种，而翅萼石斛(Dendrobium formosum)等黑毛组植物，因叶片和叶鞘被黑色毛而难彻底消毒，目前没有利用茎尖或茎段进行成功诱导不定芽的报道，也未见无菌播种快繁研究的报道。

鉴于此，有必要提供一种新的翅萼石斛种苗的繁殖方法，以解决现有技术的弊端。

发明内容

本发明的目的之一，是提供一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基。本发明的培养基，由种子萌发和原球茎诱导培养基、原球茎增殖和丛生芽诱导培养基以及生根壮苗培养基组成，其中，种子萌发和原球茎诱导培养基可以极大促进种子萌发和原球茎生长，原球茎增殖和丛生芽诱导培养基可以极大促进原球茎增殖和丛生芽生长，生根壮苗培养基可以极大促进生根壮苗。三种培养基相互作用，极大地提高了原球茎增殖倍数及诱导丛生芽产生，非常适合由翅萼石斛种子繁殖成苗。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种使翅萼石斛种子快速繁殖成苗的培养基，由种子萌发和原球茎诱导培养基、原球茎增殖和丛生芽诱导培养基以及生根壮苗培养基组成，其中，

所述种子萌发和原球茎诱导培养基由MS基本培养基、0.5-2.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA和20g/L的蔗糖组成；

所述原球茎增殖和丛生芽诱导培养基由MS基本培养基、1.0-4.0mg/L的6-BA、0.1mg/L的NAA、20g/L的蔗糖和100g/L的马铃薯泥组成；

所述生根壮苗培养基由MS基本培养基、1.0-4.0mg/L的6-BA、0.5mg/L的KT、0.5mg/L的NAA、100g/L的香蕉泥、30g/L的蔗糖和1.0g/L的活性炭组成。

本发明的原理说明：

MS，即MS培养基，是目前使用最普遍的培养基。其具有较高的无机盐浓度，能够保证组织生长所需的矿质营养还能加速愈伤组织的生长。由于配方中的离子浓度高，在配制、贮存和消毒等过程中，即使有些成分略有出入，也不会影响离子间的平衡。MS固体培养基可用于诱导愈伤组织，也可用于胚、茎段、茎尖及花药的培养，其液体培养基用于细胞悬浮培养时能获得明显的成功。MS培养基的无机养分的数量和比例比较合适，足以满足植物细胞在营养上和生理上的需要。因此，一般情况下，不用再添加氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有机附加成分。和其它培养基的基本成分相比，MS培养基中的硝酸盐、钾和铵的含量高，这是它的显著特点。