[发明专利]一种低分子多肽的制备方法

说明书

本发明公开了一种低分子多肽的制备方法，该制备方法包括以下步骤：（1）前处理：羊胎盘去杂、水洗、晾干、剪切、冷冻、超微粉碎；（2）酶解：向浆液中加水，调pH至7.7~7.8，加胰蛋白酶和Protamex，升温至40~43℃反应，滤纸过滤后取滤液；（3）提取：向酶解液中加乙醇、氯化钠和硅藻土，调pH至6.4~6.6，在10~15℃下搅后压滤，取上清液；向粗提液中加乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮，调pH至6.8~7.0，在3~5℃下搅后压滤，取沉淀；取沉淀冷冻，于0~10℃下超微粉碎，加水，在10~15℃下搅后有机过滤膜过滤并取滤液，冷冻，即得；过程中控温、控量、控时等，获得低分子多肽。

技术领域

本发明涉及一种低分子多肽的制备方法。

背景技术

胎盘富含孕育生命所必需的所有原始生命物质。目前，胎盘尤其是羊胎盘的药用和保健功效越来越受到人们的关注。就羊胎盘而言，其中含有丰富的蛋白质、17种氨基酸、14种微量元素、磷脂、脂多糖、维生素，还有与免疫功能和机体正常运转相关的多种活性多肽，其营养成分天然搭配的比例最接近人体的需求。《本草纲目》中即对羊胎盘的功效有所记载：″羊胎，母羊腹中的胎兽，性味甘温，具有益气补虚，温中暖下，调补肾虚、羸瘦之功效″。科学家经过大量实验证实，羊胎盘还具有养血安神、丰肌泽肤、延年益寿等功效，是大补元气的滋补强壮药。综上所述，胎盘的功能特性日益为人们所认识，客观上也提出了胎盘深加工的要求。由于胎盘中含有大量人体必需的活性物质，因此，从中提取功能性的多肽具有广阔的开发前景。

然而现有技术中制备的多肽中含有相当的高分子量多肽，不利于皮肤吸收，限制了其应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种低分子多肽的制备方法，来获得低分子多肽。

本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：

一种低分子多肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)前处理

取新鲜羊胎盘，去除筋膜和血管，水洗，于室温下晾1～2hr；剪切成块，于-30～-20℃下冷冻8～12hr，于0～10℃下超微粉碎得到浆液；

(2)酶解

搅拌条件下，向浆液中加入水，加入0.8～1.1mol/l的碳酸钠水溶液调节体系pH至7.7～7.8，加入胰蛋白酶和Protamex，升温至40～43℃进行反应，至酶解完全，用滤纸过滤后取滤液，即为酶解液；

按质量计，浆液、水、胰蛋白酶和Protamex的用量比为1∶4～6∶0.2～0.4∶0.1～0.2；

(3)提取

向酶解液中加入乙醇、氯化钠和硅藻土，加入0.8～1.1mol/l的盐酸水溶液调节体系pH至6.4～6.6，在10～15℃下搅拌30～45min，在10～15℃下以1.6～2.0Kg/cm²的压力进行压滤，取上清液，即为粗提液；按质量计，酶解液、乙醇、氯化钠和硅藻土的用量比为1∶0.08～0.12∶0.04～0.06∶0.05～0.08；

向粗提液中加入乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮，加入0.8～1.1mol/1的盐酸水溶液调节体系pH至6.8～7.0，在3～5℃下搅拌30～45min，在3～5℃下以1.6～2.0Kg/cm²的压力进行压滤，取沉淀；按质量计，粗提液、乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮的用量比为1∶0.08～0.12∶0.02～0.04∶0.03～0.05∶0.04～0.06；

取沉淀于-30～-20℃下冷冻8～12hr，于0～10℃下超微粉碎，加入水，在10～15℃下搅拌30～45min，用0.45μm或0.22μm有机过滤膜过滤并取滤液，于-30～-20℃下冷冻8～12hr，即得；按质量计，沉淀和水的用量比为1∶2～3。

进一步优选为：包括以下步骤：