[发明专利]一种低分子多肽的制备方法

权利要求书

1.一种低分子多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）前处理

取新鲜羊胎盘，去除筋膜和血管，水洗，于室温下晾1~2hr；剪切成块，于-30~-20℃下冷冻8~12hr，于0~10℃下超微粉碎得到浆液；

（2）酶解

搅拌条件下，向浆液中加入水，加入0.8~1.1mol/l的碳酸钠水溶液调节体系pH至7.7~7.8，加入胰蛋白酶和Protamex，升温至40~43℃进行反应，至酶解完全，用滤纸过滤后取滤液，即为酶解液；

按质量计，浆液、水、胰蛋白酶和Protamex的用量比为1:4~6:0.2~0.4:0.1~0.2；

（3）提取

向酶解液中加入乙醇、氯化钠和硅藻土，加入0.8~1.1mol/l的盐酸水溶液调节体系pH至6.4~6.6，在10~15℃下搅拌30~45min，在10~15℃下以1.6~2.0Kg/cm²的压力进行压滤，取上清液，即为粗提液；按质量计，酶解液、乙醇、氯化钠和硅藻土的用量比为1:0.08~0.12:0.04~0.06:0.05~0.08；

向粗提液中加入乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮，加入0.8~1.1mol/l的盐酸水溶液调节体系pH至6.8~7.0，在3~5℃下搅拌30~45min，在3~5℃下以1.6~2.0Kg/cm²的压力进行压滤，取沉淀；按质量计，粗提液、乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮的用量比为1:0.08~0.12:0.02~0.04:0.03~0.05:0.04~0.06；

取沉淀于-30~-20℃下冷冻8~12hr，于0~10℃下超微粉碎，加入水，在10~15℃下搅拌30~45min，用0.45μm或0.22μm有机过滤膜过滤并取滤液，于-30~-20℃下冷冻8~12hr，即得；按质量计，沉淀和水的用量比为1:2~3。

2.根据权利要求1所述的一种低分子多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）前处理

取新鲜羊胎盘，去除筋膜和血管，水洗，于室温下晾1.5hr；剪切成块，于-25℃下冷冻10hr，于4℃下超微粉碎得到浆液；

（2）酶解

搅拌条件下，向浆液中加入水，加入1.0mol/l的碳酸钠水溶液调节体系pH至7.8，加入胰蛋白酶和Protamex，升温至42℃进行反应，至酶解完全，用滤纸过滤后取滤液，即为酶解液；

按质量计，浆液、水、胰蛋白酶和Protamex的用量比为1:5:0.3:0.15；

（3）提取

向酶解液中加入乙醇、氯化钠和硅藻土，加入1.0mol/l的盐酸水溶液调节体系pH至6.5，在12℃下搅拌40min，在12℃下以1.8Kg/cm²的压力进行压滤，取上清液，即为粗提液；按质量计，酶解液、乙醇、氯化钠和硅藻土的用量比为1:0.10:0.05:0.06；

向粗提液中加入乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮，加入1.0mol/l的盐酸水溶液调节体系pH至6.9，在4℃下搅拌40min，在4℃下以1.8Kg/cm²的压力进行压滤，取沉淀；按质量计，粗提液、乙醇、氯化钠、硅藻土和麸皮的用量比为1:0.10:0.03:0.04:0.05；

取沉淀于-25℃下冷冻10hr，于4℃下超微粉碎，加入水，在12℃下搅拌40min，用0.22μm有机过滤膜过滤并取滤液，于-25℃下冷冻10hr，即得；按质量计，沉淀和水的用量比为1:2.4。

3.根据权利要求1或2所述的一种低分子多肽的制备方法，其特征在于，步骤（3）的每步中添加的乙醇和水均经过预热处理，预热的温度与其搅拌反应的温度一致。