[发明专利]一种IL-6基因的快速扩增检测方法在审
| 申请号： | 201810865421.9 | 申请日： | 2018-08-01 |
| 公开（公告）号： | CN108949938A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 黄韫平;王涛;梁志宝 | 申请（专利权）人： | 新开源鸿辉(广州)生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6883;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人： | 安曼;熊娴 |
| 地址： | 510375 广东省广州市荔*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 扩增 位点 扩增检测 扩增模板 引物特异性 检测试剂 扩增产物 扩增体系 扩增效率 灵活选择 一盒多用 多重PCR 试剂盒 基因 错配 引物 条目 检测 延伸 | ||
1.一种IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述扩增方法在同一扩增体系中同时扩增IL-6基因的174位点和597位点，174位点作为扩增模板的序列选自序列表SEQ IDNO:1所示的序列中，597位点作为扩增模板的序列选自序列表SEQ ID NO:2所示的序列中。
2.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述方法中用于扩增SEQ ID NO：1所示片段的上游引物序列如序列表SEQ ID NO:3所示，下游引物序列如序列表SEQ ID NO:4所示。
3.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述方法中用于扩增SEQ ID NO：2所示片段的上游引物序列如序列表SEQ ID NO:5所示，下游引物序列如序列表SEQ ID NO:6所示。
4.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述扩增方法采用提取的人全血DNA作为扩增模板。
5.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，扩增方法采用的扩增体系为25μL的PCR体系，具体包括：
1×PCR buffer 2μL；
Mg2+(25mmol/L)1μL；
dNTPs(25mmol/L)0.6μL；
Taq酶(5U/μL)0.3μL；
模板DNA 2μL；
IL-6 174型和IL-6 597型上下游引物(10μmol/L)各1μL；
无菌双蒸水补齐至25μL。
6.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述扩增方法的具体扩增条件为：94℃预变性5.5min；然后94℃变性30s，58℃退火90s，72℃延伸50s，30个循环。
7.根据权利要求1所述的IL-6基因的快速扩增检测方法，其特征在于，所述扩增方法还包括全血扩增缓冲液，缓冲液含有100mmol/L Tris-HCl，50mmol/L KCl，pH9.3～9.5。
8.一种IL-6基因特异性引物在IL-6的扩增试剂盒中的应用，其特征在于，所述扩增试剂盒采用如权利要求1～7任一项所述的扩增方法在同一扩增体系中同时扩增两段IL-6基因。
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