[发明专利]一株产抗癌活性物质的公牛链霉菌菌株发酵方法及其次级代谢产物的提取方法

说明书

本发明公开了一株产抗癌活性物质的公牛链霉菌菌株发酵方法及其次级代谢产物的提取方法，所述放线菌为公牛链霉菌(Streptomyces tauricus)，命名为公牛链霉菌FGR‑015，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2018年6月14日，保藏编号为CGMCC No 15942。与现有技术相比，本发明的有益效果是：公牛链霉菌FGR‑015的次级代谢产物不仅仅是一种色素，还是有较强活性地抑菌剂和抗癌物质，且经过本发明发酵、提取方法的优化后，产量可达1.124g/L，产量是以前的5.5倍。

技术领域

本发明涉及微生物生产技术领域，具体涉及一株产抗癌活性物质的公牛链霉菌菌株发酵方法及其次级 代谢产物的提取方法。

背景技术

恶性肿瘤是全世界一个主要的致死病种，据世界卫生组织报道，2012年全世界因恶性肿瘤死亡的人次 达820万，预计恶性肿瘤病例将持续迅猛增长，将逐年递增至2025年1900万人，2035年达2400万人。 肿瘤严重威胁人类生命健康，而现有大多化学药物在治疗疾病的同时，不仅仅杀伤肿瘤细胞，正常细胞也 收到严重的伤害，从而使患者产生了严重的不良反应。因此，寻求一类高效、低毒的抗肿瘤药物迫在眉睫， 将有助于提高用药安全性和有效性。

放线菌是一类次级代谢产物功能丰富的菌属，其次级代谢产物不仅可作为色素、抗生素等，放线菌还 是一类具有开发利用潜质的抗癌药物，在生命科学领域、食品行业、饲料添加剂、医学科学及化工工业等 行业具有潜在的应用价值。但是产量受发酵、提取等各个不确定因素的制约，而无法大量生产。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了一株产抗癌活性物质的放线菌菌株发酵方法及 其次级代谢产物的提取方法。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一株产抗癌活性物质的公牛链霉菌菌株，所述放线菌 为公牛链霉菌，命名为公牛链霉菌(Streptomyces tauricus)FGR-015，保藏单位为中国微生物菌种保藏 管理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编 100101)，保藏时间为2018年6月14日，保藏编号为CGMCC No.15942。

本发明的第二个目的是提供了上述一株产抗癌活性物质的公牛链霉菌菌株的发酵方法，包括有种子发 酵和扩大培养发酵：

所述种子培养基组成为：马铃薯淀粉15g，葡萄糖5g，大豆粉10g，氯化钠1g，酵母提取物5g，碳 酸钙5g，蒸馏水1000mL；pH值调节为7.1；种子的发酵方法为：接种量为5％～25％，装瓶量为20％～ 70％，摇床转速为120～170r/min，摇床温度为22～32℃，发酵时间为4～5d；

所述扩大培养基组成为：可溶性淀粉20g，KNO₃ 0.1g，K₂HPO₄ 0.05g，MgSO₄·7H₂O0.05g，NaCl 0.05 g，FeSO₄·7H₂O 0.001g，蒸馏水1000mL，pH值调节为7.1；扩大发酵方法为：种子接种量为12.61％， 装瓶量为48.65％，摇床转速为150r/min，摇床温度为28℃，发酵时间为7.5d。

本发明的第三个目的是提供了公牛链霉菌(Streptomyces tauricus)FGR-015菌株次级代谢产物的提 取方法，包括以下步骤：

1)将以上述发酵方法制备得到的扩大发酵产物，以离心转速为10000r/min，4℃离心20min，弃沉淀 物；