[发明专利]一种检测荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的高效液相方法

说明书

本发明提供了一种可适用于整体控制荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒质量的高效液相特征图谱检测方法。本发明的HPLC特征图谱检测方法，能整体控制荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒中的特征成分，确保荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒整体质量的稳定，且方法操作简单，精密度高，稳定性好，重复性好，准确度高。

技术领域

本发明具体涉及一种荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的HPLC检测方法。

背景技术

荷叶为睡莲科植物莲Nelumbo nucifera Gaertn.的干燥叶，始载于《食疗本草》，具有清暑化湿，升发清阳，凉血止血等功效，用于暑热烦渴，暑湿泄泻，脾虚泄泻，血热吐魈，便血崩漏，为临床常用中药品种。荷叶中主要含有荷叶碱、原荷叶碱、前荷叶碱等多种生物碱类成分，同时也含有槲皮素等黄酮类成分。现代研究表明，荷叶中生物碱类成分具有降脂减肥、抑菌、抗病毒等药理活性，荷叶黄酮类成分具有调节血脂、抗脂质氧化、清除自由基、抗病毒、抑菌等作用，这些化学成分的整体组成与含量是荷叶发挥临床疗效的基础，因此，要确保荷叶临床疗效，需要对其药效成分进行整体质量控制。

目前，《中国药典》2015年版一部荷叶项下尚未收载采用高效液相色谱法测定成分含量或进行特征图谱控制的方法。其他有部分文献研究报道建立了荷叶药材、配方颗粒的指纹图谱，如杨鹏,陈波,陈希平,等.荷叶HPLC-UV指纹图谱研究[J].中南药学,2011,9(4):290-293；孙冬梅，陈雪婷，李养学，等.荷叶配方颗粒的HPLC指纹图谱研究[J].广东药学院学报,2013,29(2):159-162.收载了用于控制荷叶药材指纹图谱的高效液相色谱法。

然而，上述报道是均是单独针对荷叶药材和配方颗粒研究建立的指纹图谱，检测方法各不相同，因此，难以有效对比和分析荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱的差异与变化，难以深入认识荷叶药效物质基础在从药材到配方颗粒的工艺过程的传递情况，难以整体评价和控制从荷叶药材到荷叶配方颗粒成品的工艺过程。因此，建立统一的荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定方法，有利于整体评价从药材到配方颗粒的工艺过程的科学性、合理性，更能整体控制荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的内在质量，确保荷叶的临床疗效。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种适用于荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒特征图谱测定的HPLC检测方法。

本发明的整体控荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒的高效液相特征图谱检测方法，包括如下操作步骤：

1)对照品溶液制备：取对照品，溶解，即得对照品溶液；

2)供试品溶液制备：取荷叶药材、饮片、标准汤剂、配方颗粒，经提取，即得供试品溶液；

3)分别吸取对照品溶液、对照药材溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪，色谱条件如下：

色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；检测波长：235～280nm；流动相：甲醇-乙腈(1：1)混合溶液为流动相A，0.1％甲酸-0.2三乙胺％混合水溶液为流动相B；梯度洗脱程序如下：

其中，步骤1)所述对照品包括：荷叶碱、芦丁、金丝桃苷、紫云英苷四种对照品。

其中，步骤1)所述溶解是加入甲醇溶解。

其中，步骤2)所述提取是指：加入水，煎煮提取。

优选地，所述提取方法如下：

取荷叶标准汤剂粉末或荷叶配方颗粒，加入50倍～250倍水，超声或回流处理15～45分钟，放冷，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得荷叶标准汤剂粉末或荷叶配方颗粒的供试品溶液。