[发明专利]一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法

权利要求书

1.一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）设计与合成核酸适配体片段；

设计一段能够对卡那霉素具有特异性亲和力而结合的DNA片段，通过DNA合成仪制备序列，DNA：5’-AGA TGG GGG TTG AGG CTA AGC CGA-3’

（2）制备Au@Ag核壳结构纳米粒子；

（3）取离心管，将浓度为10nM ～50nM的核酸适配体和浓度为10nM ～50nM的NaCl加入到1500μL的PBS缓冲液中，再加入待测样品，混合并在室温下稳定，然后向离心管中加入500μL的Au@Ag核壳结构纳米溶液，扫描其紫外可见吸收光谱；

（4）根据线性方程确定样品中卡那霉素浓度，所述线性方程为：y=0.00011x+0.39901，y为不同卡那霉素浓度下紫外吸收值比率，x为相应卡那霉素的浓度，线性相关性0.995，线性范围是80-5000 nmol/L，检测限为60nM。

2.根据权利要求1所述的一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法，其特征在于所述步骤（3）中，核酸适配体的浓度为30nM，NaCl的浓度为30nM。

3.根据权利要求1所述的一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法，其特征在于所述线性方程对应的标准曲线建立：取10个离心管，将浓度为30nM的核酸适配体和浓度为30nM的NaCl加入到1500μL的PBS缓冲液中，再加入卡那霉素，使其终浓度分别为0 nM、10nM、100 nM、500 nM、1000 nM、2000 nM、4000 nM、5000 nM、6000 nM、7000 nM，混合并在室温下稳定20min，然后向每个离心管中加入500 μL的Au@Ag核壳结构纳米溶液，扫描其紫外可见吸收光谱，根据不同卡那霉素浓度下测定的吸收值绘制卡那霉素浓度的标准曲线，线性范围是80-5000 nmol/L，检测限为60nM，标准曲线的线性方程为y=0.00011x+0.39901，y为不同卡那霉素浓度下紫外吸收值比率，x为相应卡那霉素的浓度，线性相关性0.995。

4.根据权利要求1所述的一种基于Au@Ag核壳结构比色检测卡那霉素的方法，其特征在于所述卡那霉素的特异性测定方法：取5个离心管，将浓度为30 nM的核酸适配体和浓度为30 nM的NaCl加入到1500μL的PBS缓冲液中，向各离心管中分别加入类似物氨苄青霉素、新链丝菌素、庆大霉素、四环素和卡那霉素，使加入类似物的最终浓度为3000 nM，混合并在室温下反应20分钟，然后向每个离心管中加入500μL的Au@Ag核壳结构纳米溶液，混合反应后测量可见光吸收值。