[发明专利]一种岗梅根药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法

说明书

本发明公开了一种岗梅根药HPLC‑ELSD指纹图谱的建立方法，所述建立方法包括以下步骤：(1)对照品的制备；(2)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)药材HPLC‑ELSD指纹图谱测定条件的建立及测定。上述岗梅根药材HPLC‑ELSD指纹图谱确认了17个共有峰，通过对照品，对其中10个主要色谱峰进行了明确的化学指认，其中9个为新化合物，以此建立了岗梅根药材HPLC‑ELSD特征指纹图谱。该指纹图谱的建立方法专属性强、操作简便，且具有良好的精密度、重现性和稳定性，可较全面地反映岗梅根药材化学组成的整体特征，可应用于岗梅根药材的真伪和品质鉴别，能有效地控制岗梅根药材的质量。

技术领域：

本发明涉及中药材的质量控制方法，具体涉及一种岗梅根药材的HPLC-ELSD指纹图谱建立方法。

背景技术：

岗梅根是冬青属植物梅叶冬青Ilex asprella(Hook.etArn.)Champ.ex Benth.的干燥根。广泛分布于广东、广西和海南等地。性凉、味苦、甘。具有清热解毒、生津止渴等功效，可用于治疗感冒发热、肺热咳嗽、咽喉肿痛等疾病。化学成分研究表明，岗梅根中主要含有三萜及其苷类、苯丙素类和甾醇类等化学成分，其中三萜皂苷类化合物是其主要和特征性成分(杜冰曌等，中国中药杂志，2017，42(1)：12-20；祁银德等，亚太传统医药，2009，5(3)：29-32；Wang L et al.Carbohydrate Research，2012，349：39-43；Lei Y，etal.ChemistryBiodiversity，2014，11(5)：767-775.)。现代药理研究表明，岗梅根具有抗炎、抗病毒、降血脂和抗肿瘤等药理活性(杜冰曌等，中国中药杂志，2017，42(1)：12-20；祁银德等，亚太传统医药，2009，5(3)：29-32；全国中草药汇编编写组，全国中草药汇编[M](上册).北京：人民卫生出版社1996；辛晓芳等，时珍国医国药，2015，26(1)：196-198；Kashiwada Y，et al.Journal of Natural Products，1993，56(12)：2077-2082；Zhou M，gtal.Planta Medica，2012，78(15)：1702-1705.)。

岗梅根是一种岭南地区习用的中草药，也是凉茶中常用的主要成分之一，应用极其广泛。如双梅喉片、梅翁退热片、山地岗感冒颗粒、金梅感冒片、广东凉茶颗粒和王老吉等。岗梅根的来源复杂，与同属植物容易混淆(周红等，中国药学杂志，2015，17(50)：1500-1504)，造成其市售药材品种的品质参差不齐。广东省中药材标准2009版(第一册)也仅对其进行简单的植物性状、粉末以及对照药材的薄层鉴别，尚无含量测定项和指纹图谱项，缺乏有效的质量控制方法，无法为其安全使用提供有效保障。缘于岗梅根药材的物质基础不明确，限制了其质量控制方法地建立。因此，本发明在本课题组对化学成分进行深入研究的基础之上(Wang L，et αl.Carbohydrate Research，2012，349：39-43.蔡艳等，中草药，2010，41(9)：1426-1429)，对岗梅根的特征指纹图谱进行研究，以期通过特征指纹图谱来对药材质量进行控制，为临床用药的安全、有效提供准确可靠的依据。

发明内容

本发明提供一种岗梅根药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法。具体包括如下步骤：

(1)对照品溶液的制备

精密称取对照品岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J适量，分别用30～90％甲醇溶解各稀释成浓度为0.01～0.1mg/mL的溶液，滤过，即得；

其中岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J为如下结构式的化合物：

(2)供试品溶液的制备