[发明专利]一种岗梅根药材HPLC-ELSD指纹图谱的建立方法

权利要求书

1.一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下操作步骤：

（1）对照品溶液的制备

精密称取对照品岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J适量，分别用30 ~ 90%甲醇溶解各稀释成浓度为0.01 ~ 0.1 mg/mL的溶液，滤过，即得;

其中岗梅皂苷A、岗梅皂苷B、岗梅皂苷C、岗梅皂苷D、岗梅皂苷E、岗梅皂苷F、岗梅皂苷G、岗梅皂苷H、岗梅皂苷I和岗梅皂苷J为如下结构式的化合物：

（2）供试品溶液的制备

精密称取岗梅根药材细粉，置具塞锥形瓶，精密加入60 ~ 80%甲醇，浸泡，超声处理，放至室温，微孔滤膜滤过，然后用60 ~ 80%甲醇定容，摇匀，即得；

（3）采用HPLC-ELSD色谱法测定

将步骤（2）的供试品溶液进样分析，色谱条件为：

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填料；

柱温：20 ~ 50 °C；

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为体积百分比为0.01 ~ 0.5%的三氟乙酸-水溶液，采用梯度洗脱；

检测器：蒸发光散射检测器；

其特征在于，步骤（3）中所述的梯度洗脱，洗脱程序按如下体积浓度配置进行：

0分钟时，流动相A的体积百分比为20%、流动相B体积百分比为80%；

10分钟时，流动相A的体积百分比为26%、流动相B体积百分比为74%；

26分钟时，流动相A的体积百分比为26%、流动相B体积百分比为74%；

34分钟时，流动相A的体积百分比为31%、流动相B体积百分比为69%；

46分钟时，流动相A的体积百分比为33%、流动相B体积百分比为67%；

58分钟时，流动相A的体积百分比为38%、流动相B体积百分比为62%；

66分钟时，流动相A的体积百分比为38%、流动相B体积百分比为62%；

68分钟时，流动相A的体积百分比为45%、流动相B体积百分比为55%；

75分钟时，流动相A的体积百分比为50%、流动相B体积百分比为50%；

80分钟时，流动相A的体积百分比为50%、流动相B体积百分比为50%。

2.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中的色谱条件还包括：

流速：0.8 ~ 1.2 mL/min；

进样量：10 ~ 30 μL；

蒸发光散射检测器的漂移管温度：90 ~ 110 °C；

气体流速：2.0 ~ 3.0 L/min；

增益值：1 ~ 4。

3.根据权利要求2所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中所述的流速为1 mL/min，进样量为20 μL，蒸发光散射检测器的漂移管温度为100 °C，气体流速为2.5 L/min，增益值为1。

4. 根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中所述的色谱柱为Waters XBridge C18 ，其规格为4.6 mm × 250 mm,5.0 μm。

5.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中所述柱温为35 °C。

6.根据权利要求1所述的一种岗梅根药材HPLC-ELSD特征指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤（3）中所述流动相B为0.1%三氟乙酸-水溶液。