[发明专利]一种N-溴代丁二酰亚胺有关物质的检测方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种N‑溴代丁二酰亚胺中有关物质的检测方法，步骤如下：1.用三乙胺水溶液制备N‑溴代丁二酰亚胺待测品溶液；2.开启紫外光吸收检测器，使用波长为190~210nm的紫外光进行检测，然后将步骤1.所得的待测品溶液注入到高效液相色谱仪的色谱柱中，再用流动相以0.7~0.9ml/min流速进行梯度洗脱得到色谱图；可以根据色谱图算出N‑溴代丁二酰亚胺及各有关物质的分离度，同时采用峰面积归一化法计算N‑溴代丁二酰亚胺待测品中有关物质的含量；所用流动相为磷酸水溶液‑乙腈，所用磷酸水溶液的pH为2.0‑3.0。本发明的方法具有空白基线无干扰、专属性强、分离度好等特点，其适用于N‑溴代丁二酰亚胺中杂质的检测。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种N-溴代丁二酰亚胺有关物质的检测方法。

背景技术

现有技术中鲜有关于N-溴代丁二酰亚胺中有关物质的检测方法报告，只有N-溴代丁二酰亚胺的含量测定的方法：

精确称取N-溴代丁二酰亚胺样品0.2g(准确至0.0001)加100ml蒸馏水溶解，等完全溶解后加冰醋酸5ml，再加15％碘化钾10ml盖紧碘量瓶塞摇匀，用蒸馏水封口，放置暗处15分钟后取出振摇，然后用0.1N硫代硫酸钠标准溶液定至终点时，颜色由红棕色转变为浅黄色，加2ml 0.5％淀粉指示剂振摇，滴定至蓝色消失。

但是此方法只是针对主成分的含量进行测定，并不能测得每个杂质的具体量或者分布，在使用N-溴代丁二酰亚胺作为原料进行化学反应的过程中，每个杂质的含量以及分布情况对后续的反应都有直接的影响，甚至直接影响终产品中杂质的多少，但是实际应用时，在N-溴代丁二酰亚胺原料的主成分含量基本相同的情况下，不同厂家、不同批次的原料制备出的中间体或终产品的品质区别也比较大，可能是其中的有关物质含量分布存在着较大的差别所导致的，但是目前的原料检测方法并不能检测出其中有关物质的分布情况，导致不能对原料进行有效的判断以及筛选，故需要针对此问题开发一种针对杂质测定的直观的方法。此方法可以测定N-溴代丁二酰亚胺中杂质分布情况，故而可以解决这一难题。

发明内容

基于上述现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种N-溴代丁二酰亚胺中有关物质的检测方法，可以对N-溴代丁二酰亚胺的质量进行更好的控制。

本发明的N-溴代丁二酰亚胺有关物质的检测方法，是采用高效液相色谱法实现。

所述方法包括：

(1)用三乙胺水溶液配制N-溴代丁二酰亚胺待测品溶液；

(2)先开启紫外光吸收检测器，使用波长为190～210nm的紫外光进行检测(优选为200nm)，然后将步骤(1)所得的待测品溶液注入到高效液相色谱仪的色谱柱中，再用流动相以0.6～1.0ml/min流速进行梯度洗脱(优选为0.8ml/min)，得到待测品的高效液相色谱图。

本发明中根据检测到的色谱图可以有效显示N-溴代丁二酰亚胺待测品中杂质的分布，从而可以判断待测品的质量稳定性，选择杂质稳定的N-溴代丁二酰亚胺原料从而保障所需产品的品质稳定性，在实际应用中可根据色谱图算出N-溴代丁二酰亚胺及各有关物质的分离度，同时采用峰面积归一化法计算N-溴代丁二酰亚胺待测品中有关物质的含量。

所述流动相为磷酸水溶液-乙腈混合液，所述磷酸水溶液的pH为2.0-3.0(优选为pH＝2.5)；

柱温为35～45℃(优选为40℃)；

所述三乙胺水溶液中三乙胺的浓度为1.5-2.5v/v％，优选为为2v/v％。

进一步地，所述色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，更进一步地，所述色谱柱的型号为Waters Symmetry C18，内径为4.6mm，长度为250mm，填充剂粒径为5μm。

进一步地，进样量为1ul。