[发明专利]一种从哺乳动物癌组织制备的类癌组织、方法及用途

说明书

本发明公开一种从哺乳动物癌组织制备类癌组织的方法，包括以下步骤：A1)将从哺乳动物分离的癌组织置于专用消化液中进行消化，分离为细胞；A2)将细胞置于用BSA润洗的离心管中，离心，去上清；A3)向离心管加入专用培养基，重悬细胞；A4)将细胞悬液与解冻的基质胶混合，接种于培养板，待基质胶凝固，加入专用培养基培养；本发明还公开了类癌组织及其应用；本发明提供了可用于评估术前新辅助放化疗疗效的类癌组织及其功能，以及能够高效培养类癌组织的培养基、消化液、方法。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种从哺乳动物癌组织制备的类癌组织、方法及用途。

背景技术

结直肠癌是世界范围内三大常见恶性肿瘤之一，随着生活方式的改变，其发病呈上升趋势，直肠癌约占结直肠癌的三分之一。局部进展期直肠癌是指经影像学或病理检查发现的原发肿瘤侵润出肠壁肌层直至周围有名结构(c/pT3-4b)或系膜内及真骨盆范围内出现淋巴结转移(c/pN1-2)而无远处转移(M0)的距肛门12cm以内的直肠癌(中国局部进展期直肠癌诊疗专家共识，2017)。局部进展期直肠癌的处理是大肠癌领域治疗的重点和难点之一，不同治疗方法在局部进展期直肠癌中的应用使得不同方法组合而成的治疗策略也越来越多。传统的对局部进展期直肠癌的治疗以外科手术结合手术后的放化疗为主。但在过去的10余年中，随着多项大型III期临床研究结果的公布，对于局部进展期直肠癌，术前的新辅助放化疗联合根治性手术已成为了标准治疗模式。相对于术后放化疗，术前放化疗有其临床和生物学上的优点。主要包括：放疗后肿瘤降期退缩，可提高切除率；对低位直肠肿瘤，肿瘤的退缩可能增加保留肛门括约肌的机会；降低术中播散的概率；肿瘤乏氧细胞少，对放疗较术后放疗敏感；小肠的蠕动度较术后大，未坠入盆腔，治疗的不良反应较低。

虽然进展期直肠癌术前新辅助放化疗总体上能够让患者获益，然而仍有相当比例患者新辅助治疗效果差，不能带来肿瘤降期退缩等获益。因此如选择出真正适合放化疗的患者有利于指导其个体化治疗，避免过度治疗非常重要，且符合精准医疗精神。另外部分患者新辅助放化疗后可获得肿瘤的完全消退，有研究证明这部分患者采取新辅助治疗后观察等待的策略，其远期生存与新辅助后再行手术治疗并无差别。因此如果放化疗后获得肿瘤完全消退，或许可以减弱后续的治疗，但这必须建立在准确的疗效评价基础上。新辅助治疗后评价方式主要包括肝门指诊、影像学及肠镜检查等，预测的准确率在30-60％之间，预测准确率较低。综上所述，寻找一种准确的检测方式，在新辅助放化疗前识别出对放化疗耐受的患者避免过度治疗，以及识别出对新辅助放化疗很敏感有可能获得完全病理缓解的患者采取观察等待策略避免手术，是目前进展期直肠癌领域的研究热点。

现有技术中直肠癌的新辅助放化疗的评估包括下述8种。

1、肿瘤细胞系，肿瘤细胞系比较容易培养，能够用于开展大规模抗肿瘤药物(或疗法)筛选。但肿瘤细胞系有若干天然的重大缺陷：1)某个肿瘤细胞系建系来源于某个患者肿瘤组织，众所周知，不同肿瘤患者的肿瘤具有很大的异质性，因此某个或某几个肿瘤细胞系不能代表临床上的每位患者；2)肿瘤细胞系的遗传背景和基因表达谱与临床患者肿瘤组织中的肿瘤细胞相差较大；3)肿瘤细胞系往往经过非常多次的传代，其遗传背景和基因表达情况会有变化，且存在交叉污染的风险。因此截至目前，肿瘤细胞系只能作为临床转化前的基础探索性研究工具，不具备直接临床转化能力。肿瘤细胞系无法用于预测直肠癌新辅助患者的放化疗疗效。