[发明专利]一种重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法有效
| 申请号： | 201810843255.2 | 申请日： | 2018-07-27 |
| 公开（公告）号： | CN109136207B | 公开（公告）日： | 2020-12-04 |
| 发明（设计）人： | 卢英华;熊维德;曾宪海;姚传义;沈亮;陈翠雪 | 申请（专利权）人： | 厦门大学 |
| 主分类号： | C12N9/16 | 分类号： | C12N9/16;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 |
| 代理公司： | 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 | 代理人： | 张松亭;秦彦苏 |
| 地址： | 361000 *** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 大肠杆菌 生产 磷脂酶 方法 | ||
1.一种重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：包括：
1）以含有如SEQ ID No.1所示的pSC101的
2）培养步骤1）得到的含有pBADKP-PLD的重组菌，培养至高密度；然后补充营养，饱和诱导，调节温度为16～22 ℃，添加碱金属盐至浓度为0.15～0.75 M，诱导表达得到磷脂酶D；所述饱和诱导为添加诱导剂阿拉伯糖至浓度为0.03～0.04%·OD600-1。
2.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤1）中，扩增
3.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤1）中，扩增质粒pBADK骨架采用如SEQ ID No.5所示的引物3及如SEQ ID No.6所示的引物4。
4.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤1）中，以
5.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤1）中，大肠杆菌
6.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤2）中，碱金属盐为钠盐、钾盐、锂盐中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤2）中，碱金属盐为NaCl，浓度为0.15～0.75 M。
8.根据权利要求1所述的重组大肠杆菌生产磷脂酶D的方法，其特征在于：所述步骤2）中，营养为质量比为1～1.25:1的甘油和酵母粉，甘油的终浓度为20～30 g·L-1。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于厦门大学，未经厦门大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201810843255.2/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
