[发明专利]一种用高效液相色谱控制替格瑞洛异构体杂质的方法

说明书

药物对映体在体内多数情况下，会在代谢途径、药理活性以及毒副作用等方面有明显差异，表现形式有：对映体无显著的药理作用；对映体有等同或相近的药理作用；对映体有较强的毒副作用或拮抗作用；对映体有完全不同的生理活性。为了保证替格瑞洛原料的质量，建立灵敏度高专属性好的手性分析方法具体重要意义。本发明提供了一种利用高效液相色谱法手性拆分替格瑞洛异构体的方法，缩短分析时间的同时能够保证在检测期间的稳定性以及检测结果的准确度，能够实现替格瑞洛和异构体的有效分离，还能够准确测定异构体的限度，专属性强，灵敏度高，该操作方法简单，具有简便、快速的优点。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种用高效液相色谱控制替格瑞洛异构体杂质的方法。

背景技术

替格瑞洛（ticagrelor）的商品名为倍林达，是一种血小板聚集抑制剂，由英国阿斯利康有限公司研制开发，主要用于预防非ST或ST段抬高的冠脉综合征患者的血栓形成事件（血管性死亡、心肌梗死，卒中）。该药物属于新型环戊基三唑嘧啶类可逆性P2Y12受体拮抗剂，通过抑制新血凝块的形成，有效抑制动脉粥样化血栓的形成，弥补了氯吡格雷抗血小板作用起效慢，个体差异性大等不足。

替格瑞洛化学名为2-（1S,2S,3R,5S）-3-[7-{[（1R,2S）-2-(3,4-二氟苯基）丙胺氨]氨基}-5-（丙硫基）-3H-[1,2,3]三唑并[4,5-d]嘧啶-3-基]-5-（2-羟基乙氧基）环戊烷-1,2-二醇，分子式为C₂₃H₂₈F₂N₆O₄S，具体结构见图1，有6个手性中心，理论上有64种手性异构体，实际在成品的质量控制中主要控制三种异构体：对映异构体J，非对映异构体H、I。

发明内容

药物对映体在体内多数情况下，会在代谢途径、药理活性以及毒副作用等方面有明显差异，表现形式有：对映体无显著的药理作用；对映体有等同或相近的药理作用；对映体有较强的毒副作用或拮抗作用；对映体有完全不同的生理活性。为了保证替格瑞洛原料的质量，建立灵敏度高专属性好的手性分析方法具体重要意义。在研究过程中，本人发现已有相关文献对替格瑞洛异构体杂质控制的分析方法，但发现文献[1]的分析时间过长（大于75min），见图2；而文献[2]异构体杂质和替格瑞洛的相对校正因子相差较大，与文献[1]的相对校正因子相矛盾；故本发明开发了一种利用高效液相色谱法手性拆分替格瑞洛异构体的方法，缩短分析时间的且与文献1中杂质相对校正因子接近，同时能够保证在检测期间的稳定性以及检测结果的准确度，能够实现替格瑞洛和异构体的有效分离，还能够准确测定此异构体的限度，专属性强，灵敏度高，该操作方法简单，具有简便、快速的优点。所述方法包括如下步骤：

1）制流动相为正己烷、甲基叔丁基醚、四氢呋喃混合溶液，

2）添加剂为二乙胺、三乙胺，添加量为0.1%~0.2%和冰醋酸、三氟乙酸，添加量为0.02%~0.1%

3) 色谱柱使用Chiralpak AD-H (4.6*250mm,5.0um) ，Chiralpak IC (4.6*250mm,5.0um)；

4）高效液相色谱系统进行检测的进样体积为20~50μL，流动相流速为0.9~1.1ml/min，色谱柱的柱温为30~40℃。

5）高效液相色谱系统的检测器为DAD检测器，检测波长为254nm

6）替格瑞洛杂质H、I、J储备液：称取杂质H于100mL容量瓶中，加流动相溶解制成每1ml约含100ug的杂质H储备溶液，同法配置I、J储备溶液。

具体实施方式