[发明专利]一种从乌药中分离去甲异波尔定的方法

权利要求书

1.一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

(1)制备乌药粗提取液：将乌药经过蒸馏水浸泡、浸提、过滤和离心分离过程，得到乌药粗提取液；

(2)初步纯化：利用大孔吸附树脂柱，依次使用蒸馏水和质量浓度为70％的乙醇对上述制备得到的乌药粗提取液进行洗脱，得到的乙醇洗脱液经过浓缩、冷冻干燥后得到乌药粗提取物；

(3)分离纯化乌药粗提取物：利用高速逆流色谱对上述乌药粗提取物进行分离提纯，得到去甲异波尔定。

2.根据权利要求1所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤(1)具体包括如下步骤：

(a)称取乌药原料，并称取3～5倍质量的蒸馏水；将乌药加入到蒸馏水中浸泡过夜；

(b)然后在70～100℃水浴条件下浸提30～60min，并适时搅拌，接着进行过滤分别得到滤液和滤渣；

(c)向上述得到的滤渣中加入3倍质量的蒸馏水，并重复上述步骤(b)；

(d)合并步骤(b)和步骤(c)得到的滤液，经过离心分离，得到上清液即为乌药粗提取液。

3.根据权利要求1所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤(2)具体包括如下步骤：

(A)先量取500mL AB-8大孔吸附树脂用95％乙醇浸泡12～24h，装柱；然后使用蒸馏水对上述大孔吸附树脂柱进行洗涤至流出液无醇味；

(B)取上述步骤(1)中得到的乌药粗提取液加入盐酸调节pH值至2～3，然后以3～5BV/h流速上样，上样完成后静置30～60min；

(C)接着加入蒸馏水进行洗脱，至洗脱液无色；

(D)再以3～5BV/h流速加入质量浓度为70％的乙醇进行洗脱，洗至洗脱液无色，收集全部的乙醇洗脱液；

(E)将上述乙醇洗脱液加入到旋转蒸发仪进行浓缩处理，然后经过冷冻干燥得到乌药粗提取物。

4.根据权利要求1所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤(3)具体包括如下步骤：

A、按照体积比为8:6:2:1分别量取三氟乙酸水溶液、正丁醇、甲基叔丁基醚、和乙腈，备用；将量取的溶剂混合均匀后静置过夜，然后进行两相分离和超声脱气，分别得到上相和下相；所述三氟乙酸水溶液中三氟乙酸的体积百分数为0.2％；

B、设置高速逆流色谱的技术参数：主机转速为850～900r/min，柱温为20～25℃，检测波长为280nm；

C、将步骤A中得到的上相作为固定相、下相作为流动相，并以1.8～2.0mL/min的流速加入高速逆流色谱仪中；待上下相平衡后，将300mg乌药粗提取物用20ml下相溶解并注入高速逆流色谱仪中，然后采集色谱图，根据色谱图峰形分段收集流出液；

D、分别取上述流出液经过浓缩、冷冻干燥即可得到去甲异波尔定。

5.根据权利要求4所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤B中设置主机转速为850r/min。

6.根据权利要求4所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤C中乌药粗提取物的上样量不大于300mg。

7.根据权利要求4所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤C中乌药粗提取物的上样量为300mg，流动相流速为2.0ml/min，收集流出液的时间区间为183～190min和190～250min。

8.根据权利要求4所述的一种分离乌药中去甲异波尔定的方法，其特征在于，所述步骤D中流出液在55℃条件下旋转蒸发浓缩。