[发明专利]pSP107质粒及其应用、构建方法

权利要求书

1.一种如SEQ ID No.1所示核苷酸序列的pSP107质粒。

2.如权利要求1所述的pSP107质粒作为菰黑粉菌UET2或UEMT2的表达载体的应用。

3.如权利要求1所述的pSP107质粒在菰黑粉菌UET2或UEMT2中表达获得UeTSP和UeMTSP菌株的应用，所述的UeTSP和UeMTSP菌株能够侵染茭白使茭白孕茭。

4.如权利要求1所述的pSP107质粒的构建方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）获得菰黑粉菌UET1菌株基因组DNA；

2）以菰黑粉菌UET1菌株基因组DNA为模板，以mfa1.2F和mfa1.2R，bE1F和bE1R为引物进行PCR，获得mfa1.2和bE1基因序列，所述的mfa1.2F的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，mfa1.2R的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，bE1F的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，bE1R的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示；

3）用mfa1.2F和bE1R引物，以mfa1.2和bE1基因序列为模板，进行融合PCR，将mfa1.2和bE1基因连接成一个长片段；

4）将融合PCR产物和pUMa932质粒经限制性内切酶ECORⅤ和HindⅢ双酶切2h后的产物，连接后转化到大肠杆菌DH5α感受态细胞中，挑取单克隆培养后测序验证，提取重组质粒，即为表达质粒pSP107。