[发明专利]一种抗人PD1单克隆抗体及用途

说明书

本发明涉及一种抗人PD1单克隆抗体及用途，同时提供了该抗体的编码核酸分子、表达载体、宿主细胞、以及用于表达该抗体的方法。还提供了包括本发明抗体的抗体免疫偶联缀合物、双特异性分子、嵌和抗原受体、药物组合物及用途。相对于现有技术，本发明具有以下优点：本发明的能特异识别人PD1的单克隆抗体，该抗体与人PD1结合的亲和力强于现有抗人PD1单克隆抗体，其序列新颖。

技术领域

本发明涉及了一种高亲和力且具有功能性的抗人PD1的单克隆抗体或抗体片段。本发明同时提供了该抗体的编码核酸分子、表达载体、宿主细胞、以及用于表达该抗体的方法。还提供了包括本发明抗体的抗体免疫偶联缀合物、双特异性分子、嵌和抗原受体、药物组合物以及诊断和治疗方法。

背景技术

程序性死亡受体1，又称PD-1或CD279,属于CD28超家族成员。PD-1主要表达在激活的B细胞，T细胞和骨髓细胞上(Agata et al.,supra；Okazaki et al.(2002)Curr.Opin.Immunol.14:391779-82；Bennett et al.(2003)J Immunol 170:711-8)。与CD28家族的其它成员不同，由于PD-1结构中不含非配对的半胱氨酸，提示PD1主要以单体形式存在。

PD-1是一种55kDa的I型跨膜蛋白，胞外有免疫球蛋白可变区样结构，胞内区中含一个近膜端的免疫受体酪氨酸抑制基序(immunoreceptor tyrosine inhibitory motif，ITIM)和远膜端的免疫受体酪氨酸转换基序(immunoreceptor tyrosine based switchmotif，ITSM)(Thomas,M.L.(1995)J Exp Med181:1953-6；Vivier,E and Daeron,M(1997)Immunol Today 18:286-91)。

尽管PD1结构上类似于CTLA4,但由于缺乏MYPPY基序而不能结合B7-1和B7-2。PD-L1和PD-L2是被证实的PD-1的两个配体分子。

大量证据显示，PD1和其配体相互作用负调节于免疫反应。PD-L1在多数癌细胞表面高表达(Dong et al.(2002)Nat.Med.8:787-9)。PD-1/PD-L1相互作用可导致肿瘤浸润性淋巴细胞减少、TCR介导的细胞增殖抑制和免疫逃逸(Dong et al.(2003)J.Mol.Med.81:281-7；Blank et al.(2005)Cancer Immunol.Immunother.54:307-314；Konishi et al.(2004)Clin.Cancer Res.10:5094-100)。通过抑制PD-L1/PD-1相互作用可逆转免疫抑制，如果同时阻断PD-L2/PD-1可进一步增强逆转的效果(Iwai et al.(2002)Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA 99:12293-7；Brown et al.(2003)J.Immunol.170:1257-66)。

PD-1缺失小鼠表现出多种自身免疫表型，包括自免疫心肌病、关节炎/肾炎并发的狼疮样综合症(Nishimura et al.(1999)Immunity 11:141-51；Nishimura et al.(2001)Science 291:319-22)。而且，PD-1在自身性脑脊髓炎、系统性红斑狼疮、移植物抗宿主病、I型糖尿病、类风湿性关键炎等疾病中发挥重要作用(Salama et al.(2003)J Exp Med 198:71-78；Prokunina and Alarcon-Riquelme(2004)Hum Mol Genet 13:R143；Nielsen etal.(2004)Lupus13:510)。在一个小鼠的B细胞肿瘤细胞中，PD-1的ITSM基序对BCR介导的Ca波动和下游分子的酪氨酸磷酸化起关键阻断件用(Okazaki et al.(2001)PNAS98:13866-71)。