[发明专利]抗EB病毒衣壳抗原和早期抗原抗体的校准品和质控品及其制备方法

说明书

本发明公开了抗EB病毒衣壳抗原和早期抗原抗体的校准品和质控品及其制备方法。本发明原料容易获取，制备工艺简单，校准品制备的校准曲线相关性高、真实可靠，本发明检测的VCA和EA的NPC阳性率高，具备准确性高、灵敏度好、特异性强以及稳定性好的特点，可以用于临床病人疗效的监测。进一步提高了抗EB病毒的VCA‑IgA以及EA‑IgA抗体的校准品和质控品的产品性能，在生物检测领域发挥重要作用。

技术领域

本发明涉及一种抗EB病毒衣壳抗原和早期抗原抗体的校准品和质控品及其制备方法，属于生物检测领域。

背景技术

鼻咽癌是我国常见的头颈部肿瘤，它的发生与EB病毒(Epstein-Barr)相关。我们通过检测EB病毒的衣壳抗原抗体(VCA-IgA)和早期抗原抗体(EA-IgA)，进行鼻咽癌的筛查和疗效观察。目前，VCA-IgA和EA-IgA公认的抗体血清学检测方法是免疫荧光法(IFA)，以VCA 的全蛋白作为抗原进行VCA-IgA抗体的检测，具有特异性高的特点，而且以滴度半定量作为结果，对临床疗效监测有一定的帮助。但是IFA自动化弱、主观性强、设备要求高，阻碍了其在大批量筛查检测的应用。

VCA-IgA和EA-IgA抗体的第二个检测方法：ELISA法，具有低成本、自动化等优势。第三种方法是新兴的化学发光检测法，具有自动化和精密度高的特点，缺点是成本高于ELISA 法，且厂家一般给出光子数并通过各个厂家各自赋值的校准品计算定量结果。由于目前市场上尚无结合两者的标准品，阻碍了后面两种便捷、高效方法的进一步发展。首先，由于缺乏标准品使得ELISA法仅能筛选出阴阳性两种结果，无法进行定量，临床疗效监测无法进行；其次，我国具有许多生产VCA-IgA和EA-IgA抗体ELISA和化学发光试剂盒的厂家，各个检测方法的结果无法进行统一比较，造成重复检测的浪费。

ELISA法在实际操作中受多种因素的影响，易导致检测结果的偏差，为了提高实验的准确性，临界值质控的设置显得非常重要。目前市面上缺乏有效的鼻咽癌ELISA检测临界值质控血清，常规的ELISA试剂盒常常只配备阴性和强阳性质控，无法对检测灰区的结果进行有效的监控。临床实验室需要耗时耗力对临界值质控进行配置，而且从临床样本中获得临界值质控的血清存在不少难度，而且缺乏统一标准，质量也没有保障。目前临界值质控品配置大多采用阳性血清和阴性血清进行一定比例稀释配置，采用ELSIA法需要多次检测S/CO值，筛选出合适的浓度，需要耗时耗力。而且ELISA法检测的线性结果远不如IFA法，对鼻咽癌病人VCA-IgA抗体高值的检测存在明显的后带现象，使检测不准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原抗体的校准品。

本发明的目的在于提供一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原抗体的质控品。

本发明的再一目的在于提供一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原抗体的校准品的制备方法。

本发明的再一目的在于提供一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原抗体的质控品的制备方法。

本发明所采取的技术方案是：

一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原的IgA抗体的校准品的制备方法，步骤如下：

1)通过免疫荧光法，选取含EB病毒VCA-IgA以及EA-IgA抗体的鼻咽癌病人血浆、EB病毒VCA-IgA和EA-IgA抗体阴性的正常人血浆，分别离心去沉淀；

2)向步骤1)处理的血浆加入氯化钙水浴，离心取上清，将鼻咽癌血浆和正常人血浆按比例混合，滤膜过滤，制得VCA-IgA和EA-IgA抗体校准品。

一种抗EB病毒的衣壳抗原和早期抗原的IgA抗体的质控品的制备方法，步骤如下：

1)通过免疫荧光法，选取含EB病毒VCA-IgA以及EA-IgA抗体的鼻咽癌病人血浆、EB病毒VCA-IgA和EA-IgA抗体阴性的正常人血浆，分别离心去沉淀；