[发明专利]一种油用牡丹愈伤组织培养方法有效
| 申请号： | 201810814581.0 | 申请日： | 2018-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN109042320B | 公开（公告）日： | 2022-02-08 |
| 发明（设计）人： | 杨万明;王敏;张谨华;陈林晶;马建华;杨艳君 | 申请（专利权）人： | 晋中学院 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 西安铭泽知识产权代理事务所(普通合伙) 61223 | 代理人： | 俞晓明 |
| 地址： | 030619 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 牡丹 组织培养 方法 | ||
1.一种生姜在油用牡丹愈伤组织培养中的应用，其特征在于，包括以下步骤：
S1，取油用牡丹叶片，油用牡丹叶片沿主脉方向的长度为6cm，洗净，消毒，得到无菌叶片；消毒的具体方式如下：将洗净的油用牡丹叶片用体积分数75%乙醇溶液浸泡消毒，无菌水冲洗，再放入0.1g/100ml的HgCl2溶液浸泡消毒8min，取出叶片并用无菌水冲洗，吸干水分取出，得到无菌叶片；所述油用牡丹品种为凤丹牡丹；
S2，诱导：将无菌叶片沿叶片主脉方向切开，即将每个叶片分成两半，将切开后的叶片接种在诱导培养基中，25±2℃培养，光照时间16h/d，光强2000lx，培养20天，得到叶片愈伤组织；
所述诱导培养基按以下方法配制：1L水中加入4.74g MS固体培养基、20g蔗糖，加热溶解，调pH至5.8，然后加入0.1mg的NAA、10ml生姜汁、6g琼脂，煮沸至琼脂完全溶解，灭菌；
S3，增殖：取出叶片愈伤组织，2mm×2mm×1mm切块，置于增殖培养基中，光照时间16h/d，光强2000lx，25±2℃培养25天，获得白色疏松油用牡丹叶片愈伤组织；
所述增殖培养基按以下方法配制：1L水中加入4.74g MS固体培养基、30g蔗糖，加热溶解，调pH至5.8，然后加入2mg的6-BA、10ml生姜汁、6g琼脂，煮沸至琼脂完全溶解，灭菌；
其中，S2和S3中所述生姜汁按照以下方法制备而成：生姜切片后与水按照20g:200ml的比例混合，所述生姜切片的厚度为2mm，煮沸5 ~ 10min，经快速定性滤纸过滤后收集的滤液为生姜汁。
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