[发明专利]一种快速提取基因组DNA的方法

说明书

本发明提供了一种快速提取基因组DNA的方法，其包括制备用于结合DNA的纤维素滤纸条；分别配制好裂解液，清洗液，以及洗脱液和/或扩增液；将含目标DNA的菌液浸入到含有所述裂解液中，裂解后得到粗提液；将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述裂解后的粗提液中结合核酸；将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中，去除杂质；将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液/扩增液中，将核酸洗脱下来，得到目标DNA的粗提液；该方法利用纤维素纸在30s内即可纯化来源于动物，植物，微生物材料的DNA，不需要复杂的过滤，特定的装备，如移液枪，离心机；时间、材料成本低、样品适用性广。

技术领域

本发明涉及DNA提取技术领域，尤其涉及一种快速提取基因组DNA的方法。

背景技术

DNA在生物学实验中是最普遍利用的生物分子。分子生物学的发展，使DNA分子在动物、植物、微生物方面起到举足轻重的作用，这就使得DNA分子的提取方法和效率带来了极大的挑战。而且在实验室环境外的环境中(例如野外)提取DNA的难度很大。传统的方法需要训练好的技术人员和需要离心机等不便携带的机器及其他耗材，并且耗时(1-2h)耗力耗人。传统的方法需要不断的离心，洗脱等繁杂的步骤去除污染物，需要用二氧化硅材质去纯化DNA。尽管有一些顺磁性的介质可以在10min内相对较快的纯化出DNA，但是它需要电子设备，仍然在野外的生物环境下是很复杂的。

最近的有一些方法在尝试，他们利用不同类型的膜，例如三氧化二铝、纤维素为基质的弗林德斯技术、二氧化硅材质的过滤器技术来快速的提取DNA。他们省去了洗脱的步骤，这样他们的优势是：DNA的扩增免遭遇有机相或吸附纯化DNA的材料表面的化学物质，或残留的东西的巨大影响。尽管省去了这洗脱这一步，但是仍然有许多复杂的步骤，复杂的装置，多次吸液的步骤，还有辅助的电子设备。

对比文件1：申请号为“CN201611107846.0”，名称为“一种基因组DNA提取试剂盒及提取方法”，公开了一种基因组DNA提取试剂盒及提取方法，其中基因组DNA提取试剂盒包括消化液、裂解液、纳米磁珠、洗涤液A、洗涤液B和洗脱液；该方法在充分裂解的样本溶液中，加入纳米磁珠可以特异性吸附DNA，该种吸附特异性与DNA结构及片段大小无关。通过洗涤液洗涤去除溶液中的蛋白和盐离子，最后在仅留有特异吸附DNA的磁珠中加入洗脱液，将DNA释放于洗脱液中。磁珠法提取基因组DNA的优点为不使用有毒试剂，操作简单，不易污染。然而磁珠法也存在缺点：时间成本仍然需要30min，尚有提高的空间，且材料成本较高；且操作步骤仍然较复杂，使用移液枪的次数大于5次；样品适用性较窄。

因而，开发一种时间成本和材料成本更低、操作步骤更简单、样品适用性更广的快速提取基因组DNA的方法，成为亟待解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术之缺陷，提供了一种快速提取基因组DNA的方法，该方法提取基因组DNA的速度快，提取纯化步骤少，操作简便，时间成本和材料成本更低、样品适用性更广。

本发明是这样实现的：

本发明的目的在于提供了一种快速提取基因组DNA的方法，其包括如下步骤：

步骤1、制备用于结合DNA的纤维素滤纸条：将纤维素中速定性滤纸的一部分浸泡在融化的石蜡中，浸过石蜡的滤纸为所述手柄区，另一部分没有浸过石蜡的滤纸为所述核酸结合区；

步骤2、分别配制好裂解液，清洗液，以及洗脱液和/或扩增液；

步骤3、将含目标DNA的样品浸入到所述裂解液中，裂解后得到粗提液；

步骤4、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述步骤3中裂解后的粗提液中结合核酸；

步骤5、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中，去除杂质；