[发明专利]一种快速提取基因组DNA的方法

权利要求书

1.一种快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，其包括如下步骤：

步骤1、制备用于结合DNA的纤维素滤纸条：将纤维素中速定性滤纸的一部分浸泡在融化的石蜡中，浸过石蜡的滤纸为所述手柄区，另一部分没有浸过石蜡的滤纸为所述核酸结合区；

步骤2、分别配制好裂解液，清洗液，以及洗脱液和/或扩增液；

步骤3、将含目标DNA的样品浸入到所述裂解液中，裂解后得到粗提液；

步骤4、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到所述步骤3中裂解后的粗提液中结合核酸；

步骤5、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到装有所述清洗液中，去除杂质；

步骤6、将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液中，将核酸洗脱下来，得到目标DNA的粗提液；或者将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条直接浸入到扩增液中，将核酸洗脱下来直接用于后续扩增；或者先将所述用于结合DNA的纤维素滤纸条浸入到洗脱液中，再浸入到扩增液中。

2.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述步骤2中裂解液包括溶菌酶，20mM、pH＝8.0的Tris，25mM Nacl，2.5mM、pH＝8.0的EDTA以及质量分数为0.05％的SDS。

3.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述步骤2中清洗液包括10mM pH 8.0的Tris，以及质量分数为0.1％的Tween-20。

4.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述步骤2中洗脱液包括10mM pH＝8.0的Tris、pH＝8.0的超纯水、300nM的氯化钠中的任意一种。

5.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述步骤2中扩增液包括聚合酶体系，ddH₂0，以及用于扩增目标DNA的引物对。

6.如权利要求5所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述扩增液包括2×Taqmastermix，ddH₂0，以及用于扩增目标DNA的引物对；所述扩增的反应体系为：

7.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述裂解液中设有若干个用于帮助破碎细胞的钢珠。

8.如权利要求1所述的快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述裂解液为500μl/管，所述清洗液为1500μl/管，所述清洗液为50-100μl/管。

9.如权利要求1所述快速提取基因组DNA的方法，其特征在于，所述步骤1中，具体为将WhatmanNo.1滤纸的一半浸泡在融化的石蜡中，浸过蜡的滤纸产生一个疏水区域为所述手柄区；然后将滤纸裁成大于等于39mm的长方形条，其中大于等于35mm的区域有蜡覆盖，而4-6mm区域没有经过蜡处理，后将所述长方形条切割成多个宽2-3mm的小试纸条，多个所述小试纸条上均具有一个核酸结合区和一个手柄区。