[发明专利]一种同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D2

权利要求书

1.一种同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D₂的方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）超声皂化法提取：

将食用菌样品与碱金属溶液混合均匀，再加入有机溶剂进行超声提取，得到粗提液；利用萃取剂对粗提液进行萃取，旋转蒸发溶剂，最后用无水乙醇溶解并过滤，得到提取液样品；

（2）标准液的配制：

将麦角固醇和维生素D₂标准品配制成至少三个浓度的麦角固醇和维生素D₂混合液作为标准液；

（3）液相色谱-串联质谱法测定

将步骤（2）中的各浓度梯度的标准液通过液相色谱-串联质谱法测定，以标准液的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准工作曲线；然后在相同条件下将步骤（1）中得到的提取液样品通过液相色谱-串联质谱法测定，并将检测结果与标准工作曲线对照，计算出样品中麦角固醇和维生素D₂的含量；

所述的液相色谱-串联质谱法中：在电喷雾质谱、正离子监测模式下，麦角固醇定性和定量离子对为母离子m/z=379.3、特征子离子m/z=253.4，维生素D₂定性和定量离子对为母离子m/z=397.4、特征子离子m/z=271.4；

步骤（3）中所述的液相色谱-串联质谱法中的液相色谱的条件为： 色谱柱为C₈色谱柱；洗脱条件为：流动相：A为甲醇，B为水；梯度条件：0～2 min 10%A、90%B，2～3 min100% A，3～5 min90% A、10% B；流速：2.5mL/min；

步骤（3）中所述的液相色谱-串联质谱法中的质谱的条件为：

离子源：电喷雾正离子模式；

监测方式：多反应检测；

气帘气压力：137.9 kPa；

雾化气压力：310.3 kPa；

辅助气压力: 413.7 kPa；

离子源喷射电压: 5500 V；

离子源温度:500℃；

离子源喷雾流速: 5 L/min；

麦角固醇和维生素D₂的碰撞能量分别为22 eV、18 eV；麦角固醇和维生素D₂的源内碎裂电压均为100 eV。

2.根据权利要求1所述的同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D₂的方法，其特征在于，步骤（2）中所述的标准液中麦角固醇的浓度范围为0.40～3.60mg/L，维生素D₂的浓度范围为0.22～2.2 0mg/L。

3.根据权利要求1所述的同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D₂的方法，其特征在于：所述的标准液中麦角固醇的浓度/维生素D₂的浓度配对如下：0.40 mg/L /0.22 mg/L、1.20mg/L /0.66 mg/L、2.40 mg/L /1.10 mg/L、3.00 mg/L /1.54 mg/L、3.60 mg/L /2.20 mg/L。

4.根据权利要求1所述的同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D₂的方法，其特征在于：

步骤（1）中所述的碱金属的用量为按每克按干重计的食用菌配比8g碱金属计算；

步骤（1）中所述的有机溶剂的用量为按每克按干重计的食用菌配比20 mL有机溶剂计算。

5.根据权利要求1所述的同步检测食用菌中麦角固醇与维生素D₂的方法，其特征在于：

步骤（1）中所述的食用菌为新鲜食用菌、干食用菌以及食用菌加工产品；

步骤（1）中所述的碱金属溶液为KOH溶液或NaOH溶液；

步骤（1）中所述的有机溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇中的至少一种；

步骤（1）中所述的萃取剂为石油醚，或含有抗氧化剂的石油醚。