[发明专利]一种用于检测黄瓜抗白粉病性状的SNP分子标记及其应用

权利要求书

1.一种用于检测黄瓜抗白粉病性状的SNP分子标记，其特征在于：所述SNP分子标记位于黄瓜第4号染色体，关联区域在NCBI编号NC_026660.1的片段上，起始位置22.3Mb，终止位置23.1Mb，所述SNP分子标记的序列如SEQ ID NO.1所示，其中第51nt位点处的碱基r为A或G，该位点碱基为G的黄瓜表现为抗病，碱基为A的黄瓜表现为感病。

2.用于检测权利要求1所述的SNP分子标记的特异性引物组合，其特征在于，包括：

(1)两条特异引物CS_K_040108X和CS_K_040108Y：引物CS_K_040108X的序列如SEQ IDNO.2所示，引物CS_K_040108Y的序列如SEQ ID NO.3所示；

(2)一条通用引物CS_K_040108C：其序列如SEQ ID NO.4所示。

3.权利要求2所述的特异性引物组合在检测黄瓜品种抗白粉病性状中的应用。

4.根据权利要求3所述的特异性引物组合在检测黄瓜品种抗白粉病性状中的应用，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提取待测黄瓜基因组DNA；

(2)以黄瓜基因组DNA为模板，利用权利要求2所述的特异性引物组合进行KASP反应检测，在两条特异性引物CS_K_040108X和CS_K_040108Y的5’-端分别连接FAM-tail:5’-GAAGGTGACCAAGTTCATGCT-3’和VIC-tail:5’-GAAGGTCGGAGTCAACGGATT-3’通用荧光标签序列；

(3)检测黄瓜抗白粉病性状时，若只检测到引物CS_K_040108Y所连荧光序列对应的荧光信号，则待测黄瓜表现为抗白粉病；若只检测到引物CS_K_040108X所连荧光序列对应的荧光信号，则判定待测黄瓜为不抗病材料；若同时检测到两者荧光则判断黄瓜为抗白粉病的杂合型。

5.根据权利要求4所述的特异性引物组合在检测黄瓜品种抗白粉病性状中的应用，其特征在于：选择检测到引物CS_K_040108Y所连荧光序列对应的荧光信号的黄瓜样品进行育种。

6.根据权利要求4所述的特异性引物组合在检测黄瓜品种抗白粉病性状中的应用，其特征在于，步骤(2)中KASP检测中的PCR条件为：94℃15min；95℃20sec，65-56℃60sec，每个循环退火延伸温度降低0.8℃，共10个循环；94℃20sec，57℃60sec，共26个循环。

7.权利要求2所述的特异性引物组合用于检测所述SNP分子标记的方法，该方法为：

利用权利要求2所述的特异性引物组合对待检测黄瓜的基因组DNA进行KASP检测，在引物CS_K_040108X和引物CS_K_040108Y的5’-端分别连接不同的通用荧光标签序列；若只检测到引物CS_K_040108Y所连荧光序列对应的荧光信号，则待测黄瓜为抗白粉病材料，其基因型为G，若只检测到引物CS_K_040108X所连荧光序列的荧光信号，则判定待测黄瓜为不抗白粉病的材料，其基因型为A；若同时检测到两种荧光，则判定黄瓜样品为携带抗白粉病性状的杂合型。

8.包含权利要求2所述的特异性引物组合的试剂盒。

9.权利要求8所述的试剂盒在黄瓜种质资源改良中的应用。

10.权利要求8所述的试剂盒在培育抗白粉病黄瓜中的应用。