[发明专利]一种新型DNA水凝胶的制备方法

权利要求书

1.一种DNA水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1：将DNA单链自组装形成两种模块结构；

S2：对两种模块结构分别进行琼脂糖凝胶电泳纯化和定量；

S3：引发链触发两种模块结构发生杂交链反应，以形成三维网状的DNA纳米结构；

S4：将三维网状的DNA纳米结构置于原子力显微镜下成像观察；

S5：构建形成的三维网状的DNA纳米结构进行孵育，以形成固态的水凝胶；

其中，所述两种模块结构包括模块1和模块2，所述模块1由L1、L2、L3和L4四条DNA单链组成，所述L1序列为：5’-AAGTGGATGCCGAATGACAAGCTACAAGTCCCAAGAGTTACGCTCTCCATTC-3’，所述L2序列为：5’-TTGGGACTTGTAGATACGACTCCGACGAGACTACCGTAACTCTTGAGGAGGC-3’，所述L3序列为：5’-AGACTGTCACGAGTAAGTCTTCTTGTCATTCG-3’，所述L4序列为：5’-GTAACGGGCTTGAATGGAGAGATCACTCATGCAGATGAACCGCATGAGTGATGT-3’；

所述模块2由L5、L6、L7和L8四条DNA单链组成，所述L5序列为：5’-GCCTCCTCTTCGAGACTACACCAGTCTATCGTAGGTCCGAATACGACTCCGA-3’，所述L6序列为：5’-CATGAGTGATGTAGTCTCGTCGGAGTCGTATAAGACTTACTCGTGACAGTCTGAGTAAGTCTTCAGGACGGATC-3’，所述L7序列为：5’-AAGCCCGTCACGATTCTCGGAATCACTCATGCGGTTCATCTG-3’，所述L8序列为：5’-GCATCCACTTGATCCGTCCTGTCGGACCTACGATAGACTGGTTCCGAGAATC-3’；

所述引发链的序列为：5’-CATGAGTGATGTAGTCTCGTCGGAGTCGTATAAGACTTACTCGTGACAGTCT-3’。

2.如权利要求1所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S5中，具体方法为：将三维网状的DNA纳米结构在23～27℃下孵育25～35h。

3.如权利要求1所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：两种模块结构均基于发夹结构形成，且可在横向方向和竖直方向上进行杂交。

4.如权利要求1所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S4具体为：将三维网状的DNA纳米结构的溶液滴在云母片上，静置吸附后利用氮气吹干，置于原子力显微镜气相条件下观察。

5.如权利要求4所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S4中，取3～5μL三维网状的DNA纳米结构的溶液滴在云母片上。

6.如权利要求5所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：在云母片上静置吸附3～5min后，利用氮气吹干。

7.如权利要求6所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S4中，还包括舒展操作，即采用含有二价阳离子的1×TAE作为缓冲液，缓冲液中的Mg²⁺浓度为12.5mM，将三维网状的DNA纳米结构在云母片上静置吸附一定时间后，利用缓冲溶液的水流作用和在阳离子缓冲液环境下云母片的吸附力的平衡作用将三维网状的DNA纳米结构舒展开。

8.如权利要求1所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S2中，利用琼脂糖凝胶电泳纯化，借助凝胶抽提离心柱浓缩回收，得到较高浓度的模块结构。

9.如权利要求1所述的DNA水凝胶的制备方法，其特征在于：步骤S3中，引发链触发两种模块结构发生杂交链反应的过程是一种级联反应过程。