[发明专利]一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法在审
| 申请号: | 201810755759.9 | 申请日: | 2018-07-11 |
| 公开(公告)号: | CN108676794A | 公开(公告)日: | 2018-10-19 |
| 发明(设计)人: | 李林红 | 申请(专利权)人: | 芜湖帮许来诺医疗设备科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
| 代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
| 地址: | 241080 安徽省芜湖市*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 核酸 核酸提取 裂解液 动物组织 快速提取 病料 核酸提取过程 安全隐患 初步分离 核酸沉淀 室外环境 提取试剂 试剂盒 提纯 裂解 配制 检测 改进 安全 | ||
1.一种用于动物组织病料核酸的快速提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)配制裂解液;所述裂解液包括胍盐、缓冲剂、表面活性剂和PH调节剂;
(2)组织裂解:将裂解液加入组织样本中,还用匀浆仪匀浆至无可见组织块;
(3)初步分离:放置15分钟,13000g离心5分钟,分离上清液;
(4)核酸沉淀:向上清液中加入若干体积的异丙醇,10000g离心10分钟,弃除上清液,得核酸沉淀;
(5)核酸提纯:使用浓度为75%的乙醇洗涤沉淀物,进行提纯,得所要提取的核酸。
2.根据权利要求1所述的用于动物组织病料核酸的快速提取方法,其特征在于,所述胍盐为异硫氰酸胍;所述缓冲剂为柠檬酸钠;所述表面活性剂为月桂基硫酸钠;所述PH调节剂为盐酸。
3.根据权利要求1所述的用于动物组织病料核酸的快速提取方法,其特征在于,所述裂解液配制方法为:称取一定量的异硫氰酸胍、0.75mol/L的柠檬酸钠和10%月桂基硫酸钠,加入去离子水加热搅拌溶解,使用盐酸调节溶液的PH值为7-9之间即可,装入棕色瓶内,室温保存。
4.根据权利要求2或3所述的用于动物组织病料核酸的快速提取方法,其特征在于,所述裂解液包括终浓度为4-6mol/L的异硫氰酸胍、20-25mol/L的柠檬酸钠和0.2-0.5%的月桂基硫酸钠。
5.根据权利要求1所述的用于动物组织病料核酸的快速提取方法,其特征在于,所述核酸为DNA和RNA。
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