[发明专利]一种炎症标志物联合定量检测试纸及其制备方法

说明书

一种炎症标志物联合定量检测试纸，所述炎症标志物为血清淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白与降钙素原，试纸条包括样品垫、炎症标志物抗体磁性稀土荧光微球标记垫、包被膜和吸水垫，包被膜上设有三条炎症标志物定量检测线和一条质控区C线，利用磁场将样本中的被测物质浓缩后，利用低背景、高灵敏度的荧光免疫层析法，进行检测被测物质，解决了POCT类产品灵敏度低的问题。可以避免免疫侧向层析试剂检测血液样本时，为降低血液中其他物质的干扰。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及基于用磁性稀土荧光微球作为示踪标记物的炎症标志物联合定量检测试纸及其制备方法，具体地说是，一种测定血液（血清、血浆、全血）中的血清淀粉样蛋白A/超敏C反应蛋白/降钙素原含量的检测试剂卡。

背景技术

血清淀粉样蛋白A（Serum Amyloid A Protein，SAA）是一种主要由肝细胞分泌的急性时相反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12000。SAA根据在体内表达情况，分为急性期SAA(acute SAA，A-SAA)和组成型SAA(constitutive SAA，C-SAA)。正常人体内SAA主要来源于肝细胞组成型表达的C-SAA，当机体受到感染、炎症、损伤等刺激后产生一系列细胞因子，在细胞因子的调控下A-SAA水平迅速升高，成为此时体内主要的SAA。机体在急性炎症(如外伤、感染等)反应过程中血液中SAA水平可超过正常值的1000倍以上，这种特性使得SAA成为目前最敏感的炎症标志物之一。

超敏C反应蛋白（hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP）是血浆中的一种C反应蛋白，又称为高敏C反应蛋白。超敏C反应蛋白的临床指导作用主要表现在对心血管疾病，新生儿细菌感染，肾移植等方面。超敏C反应蛋白是由肝脏合成的一种全身性炎症反应急性期的非特异性标志物, 是心血管事件危险最强有力的预测因子之一。

降钙素原（Procalcitonin，PCT）能反映全身炎症反应的活跃程度，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时血浆中的PCT水平升高，在这个过程中细菌内毒素的诱导担任了至关重要的作用。而自身免疫、过敏和病毒感染及局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致血浆中的PCT水平升高。各类研究表明，PCT是细菌感染和脓毒症的良好标记物，是临床诊断中的一个重要工具。

目前临床诊断应用最广泛的是采用进口试剂检测血清和血浆中的血清淀粉样蛋白A/超敏C反应蛋白/降钙素原。现市面上的试剂盒检测操作复杂，费时，不宜作为普通的筛查，只能用作确诊试验。同时，与此同时市面上的样本进行稀释后进行测试而造成的灵敏度偏低。

发明内容

为解决以上问题，方便测试人血清淀粉样蛋白A/超敏C反应蛋白/降钙素原检测水平的需求，本发明提供了一种简单、可靠、成本低廉、灵敏度高的一种炎症标志物联合定量检测试纸；本检测方法利用磁场将样本中的被测物质浓缩后，利用低背景、高灵敏度的荧光免疫层析法，进行检测被测物质，解决了POCT类产品灵敏度低的问题。可以避免免疫侧向层析试剂检测血液样本时，为降低血液中其他物质的干扰。

为了达到本发明的目的，本发明技术方案如下：一种炎症标志物联合定量检测试纸，所述炎症标志物为血清淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白与降钙素原，所述炎症标志物联合定量检测试纸包括盒体，所述盒体包括底板与盒盖，所述盒体内设有检测试纸，所述检测试纸下方设有底板，检测试纸上方与盒盖连接；所述盒盖设有通孔区；所述通孔区设有加样孔和结果观察窗口；所述检测试纸上方设有检测区，检测区与通孔区相对应；所述检测区包括样品垫、炎症标志物抗体磁性稀土荧光微球标记垫、包被膜和吸水垫，所述包被膜上设有三条炎症标志物联合定量检测线和一条质控区C线，所述检测线与质控区C线平行排列。

进一步，所述炎症标志物抗体磁性稀土荧光微球由高分子材料包裹磁性稀土荧光复合物，所述磁性稀土荧光微球的的球径为 10-500nm，所述荧光发射波长范围为 400-800nm，纳米微球表面修饰活性基团为为氨基、羧基或巯基。