[发明专利]一种痰液微生物的快速提纯试剂及其应用

权利要求书

1.一种痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，由液化液、细胞裂解液、核酸外切酶缓冲液组成；所述细胞裂解液含有胍盐和表面活性剂，所述胍盐在细胞裂解液中的浓度为1～2mol/L；

所述液化液中含有还原剂和pH值为7.6～8.0的磷酸盐缓冲溶液，所述还原剂为二硫苏糖醇、乙酰半胱氨酸，三(2-羧乙基)膦盐酸盐中的一种，还原剂的浓度为0.05～0.2g/100mL；每毫升核酸外切酶缓冲液中含有1～30单位的核酸外切酶，所述核酸外切酶为recombinant DNaseI。

2.根据权利要求1所述的痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，所述液化液中还含有氯化钠和氯化钾，氯化钠和氯化钾浓度分别为0.5～1.0g/100mL和0～0.05g/100mL。

3.根据权利要求1或2所述的痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，所述细胞裂解液中含有浓度为1～3mol/L的盐酸胍，所述表面活性剂为Triton-X100，NP40，IGEPAL-CA630中的一种。

4.根据权利要求3所述的痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，所述表面活性剂为IGEPAL-CA630，在细胞裂解液中的体积浓度为0.01％～1％。

5.根据权利要求3所述的痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，所述细胞裂解液为1.0～2.0mol/L的盐酸胍和0.03％～0.08％表面活性剂的水溶液。

6.根据权利要求1或2所述的痰液微生物的快速提纯试剂，其特征在于，所述液化液、细胞裂解液、核酸外切酶缓冲液的体积份数分别为1份，1～3份，0.1～0.5份。

7.权利要求1～6任一项所述的痰液微生物的快速提纯试剂在痰液液化、体液内细胞的去除与细菌富集中的应用。

8.应用权利要求1～6任一项所述的快速提纯试剂进行痰液微生物快速提纯的方法，其特征在于，包括操作：

1)将体积为液化液0.8～1.2倍的痰液转移至容器内，加入液化液液化5～20分钟；

2)加入细胞裂解液，室温放置5～30min，离心收集细菌，除去清液，向细菌中加入核酸外切酶缓冲液，30～40℃放置20～40min。