[发明专利]一种抗肿瘤制剂及制备的方法

说明书

本发明属于医药学技术领域，公开了一种抗肿瘤制剂及制备的方法，抗肿瘤制剂为搭载有anti‑PD‑L1/PD‑1人源化抗体的干细胞；制备方法包括：通过限制性内切酶和连接酶将上述片段连接进入商业化慢病毒或者腺病毒表达载体中；通过培养293T细胞包装含有anti‑PD‑L1/PD‑1人源化基因的目的病毒，检测滴度；用病毒感染上述羊膜干细胞；通过挑选单克隆获取稳定表达anti‑PD‑L1/PD‑1人源化抗体的细胞株，测序检测目的基因插入位置，并检测目的蛋白表达位置并将目的蛋白表达于细胞膜上。本发明anti‑PD‑L1/PD‑1人源化抗体可以通过干细胞靶向递送至肿瘤组织，减少全身用药导致的副作用。

技术领域

本发明属于医药学技术领域，尤其涉及一种抗肿瘤制剂及制备的方法。

背景技术

目前，业内常用的现有技术是这样的：

基于免疫检查点的广谱抗肿瘤治疗是现代抗肿瘤药物研发以及基础分析的 突破性进展，被Science杂志评为抗肿瘤分析的历史性突破。在肿瘤微环境中， 免疫细胞虽然能够浸润到肿瘤组织内，但是由于肿瘤细胞能够通过高表达细胞 表面的PD-L1而与免疫细胞膜表面的PD-1结合，从而抑制免疫细胞发挥肿瘤杀 伤作用，达到免疫逃逸的目的。近年的分析通过制备PD-L1/PD-1的特异性抗体， 在体内阻断PD-L1与PD-1结合，避免了肿瘤细胞诱导的免疫耐受，使得肿瘤患 者受益。在不久的将来，免疫疗法必将是肿瘤治疗的首选方法，目前也有大量 的分析将抗PD-L1/PD-1为代表的免疫疗法与其他治疗方法结合起来共同抗肿 瘤，并取得了相当积极的结果。

综上所述，现有技术存在的问题是：

(1)现有的抗PD-1/PD-L1制品主要为小分子化合物或者人源化单克隆抗 体，但是上述药物并不具有肿瘤靶向性，给药之后药物分布于全身各处，因此 会产生严重副作用，包括医源性糖尿病，严重的致死性心肌炎以及其他免疫性 疾病。

(2)单克隆抗体治疗费用昂贵，治疗周期长，部分限制了免疫检查点抗肿 瘤治疗的广泛应用。

(3)现有的抗PD-1/PD-L1制品并非对所有患者都能起作用，未经选择的 患者临床有效性只有20％，即使经过筛选后，也只有60％的患者能从中受益，这 可能与药物浓度不集中有一定关系。

解决上述技术问题的难度和意义：

(1)如果能够将抗PD-1/PD-L1制品局限在肿瘤区域，使之不在全身发生 反应，将会极大减轻药物副作用并提升患者的生活质量和依从性，减少药物相 关死亡率，增加药物的使用范围。但现有技术很难解决。

(2)该制剂制备相对更简单，制备成本低，有助于降低患者的医疗成本。

(3)羊膜干细胞本身具有免疫调节能力，因此不仅其携带的抗体能够调节 肿瘤区域的免疫微环境，干细胞本身也能够与肿瘤区域的微环境发生作用，可 能使患者获得双重疗效。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种抗肿瘤制剂及制备的方法。

本发明是这样实现的，一种抗肿瘤制剂，所述抗肿瘤制剂为搭载有 anti-PD-L1/PD-1人源化抗体的干细胞。

本发明的另一目的在于提供一种抗肿瘤制剂的制备方法包括：