[发明专利]肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124的应用、试剂盒及检测方法

权利要求书

1.肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124在制备预测肺癌患者预后的制剂的应用，该非编码RNA LINC01124的核酸序列如SEQ NO:1所示。

2.根据权利要求1所述的肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124的应用，其特征在于：所述的用于预测肺癌患者预后的制剂为实时荧光定量PCR检测试剂盒。

3.一种如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：包括用于检测非编码RNA LINC01124表达的特异性引物，所述特异性引物的核酸序列为SEQ NO:2和SEQ NO:3，以及内参基因TUBA1A表达的引物序列，所述引物的核酸序列为SEQ NO:4和SEQ NO:5。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：还含有从组织中提取RNA并进行逆转录及实时荧光定量PCR的所有试剂，包括(1)从肺癌的肿瘤或正常对照组织中抽提总RNA所用试剂，包括Trizol液、氯仿、异丙醇、抑制RNA降解溶剂、75％乙醇，DEPC水；(2)以总RNA为模板将非编码RNALINC01124逆转录为cDNA所用试剂，包括逆转录反应缓冲液、含有含Mg2+的三磷酸碱基脱氧核苷酸dNTP、逆转录酶M-MLV以及随机引物和Oligo dT引物的混合物；(3)将cDNA实时荧光定量PCR所用试剂，包括LINC01124实时荧光定量PCR特异性引物、TUBA1A内参特异性PCR引物、实时荧光定量SYBR染料、无RNA酶的水。

5.肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：1）收集待测肺癌或正常对照组织；

2) 组织中RNA的抽提；

3）LINC01124 RNA的逆转录，以细胞总RNA为模板，逆转录得到cDNA；

4）以cDNA为模板，利用非编码RNA LINC01124的特异性引物进行实时荧光定量PCR扩增，检测非编码RNA LINC01124表达量。

6.根据权利要求5所述肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124的检测方法，其特征在于：步骤3）中逆转录反应体系为5×RT Buffer（含Mg2+和dNTP） 4μl，10×RT PrimerMix（Oligo dT Primer和Random Hexamers混合物） 2μl，BeyoRT™ II M-MLV逆转录酶(RNase H-)（含RNase Inhibitor）2μl，DEPC-treated water 2μl，去除gDNA后的Total RNA10μl。

7.根据权利要求5所述肺癌预后新型分子标志物非编码RNA LINC01124的检测方法，其特征在于：步骤4）中检测标志物非编码RNA LINC01124的表达量用相对定量方法。