[发明专利]一种用于评估HPV16疫苗免疫效果的阻断ELISA试剂盒

权利要求书

1.一种特异性结合HPV16 E6蛋白的单克隆抗体，其特征在于，它由小鼠杂交瘤细胞系CCTCC NO：C2018153分泌。

2.一种分泌根据权利要求1所述的单克隆抗体的小鼠杂交瘤细胞系CCTCC NO：C2018153。

3.根据权利要求1所述的单克隆抗体在制备用于评估HPV16疫苗免疫效果的阻断ELISA试剂盒中的应用。

4.一种用于评估HPV16疫苗免疫效果的阻断ELISA试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含根据权利要求1所述的单克隆抗体，所述单克隆抗体用于检测HPV16疫苗接种者血液中抗HPV16免疫抗体的含量。

5.根据权利要求4所述的阻断ELISA试剂盒，其特征在于，在所述试剂盒中，用于结合所述单克隆抗体和HPV16疫苗接种者血液中抗HPV16免疫抗体的抗原是由SEQ ID NO：2所示的核酸序列编码的HPV16 E6重组蛋白，其包被浓度为1ug/ml，所述单克隆抗体是用HRP标记的单克隆抗体，并且在使用时以1∶4000稀释比例进行稀释。

6.根据权利要求4或5所述的阻断ELISA试剂盒，其特征在于，在用所述试剂盒检测时，被检样本的阻断率大于或等于40％，所述样本就可以被判为阳性，即，有HPV16抗体存在，免疫效果良好；如果被检样本的阻断率小于或等于30％，所述样本就可以被判为阴性，即无抗HPV16抗体存在，建议重新接种疫苗；如果被检样本的阻断率在30～40％之间，则判定为疑似，需要再次检测。

7.一种制备根据权利要求4所述的阻断ELISA试剂盒的方法，所述方法包括以下步骤：

(1)制备HPV16 E6重组蛋白，其由SEQ ID NO：2所示的核酸序列编码；

(2)以步骤(1)获得的重组蛋白作为免疫原，通过杂交瘤技术制备单克隆抗体；

(3)将步骤(1)获得的重组蛋白包被酶标板；

(4)用HRP标记步骤(2)获得的单克隆抗体；

从而制备以阻断ELISA为原理检测疫苗免疫者血清中HPV16免疫抗体的阻断ELISA试剂盒。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，在扩增E6蛋白基因时，对密码子进行优化，以利于得到免疫原。

9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，重组蛋白的包被浓度为1ug/ml。

10.根据权利要求7至9中任一项所述的方法，其特征在于，用HRP标记的单克隆抗体在使用时以1∶4000稀释比例进行稀释。