[发明专利]一种胱抑素C检测试剂盒

说明书

本发明涉及体外诊断技术领域，尤其是一种胱抑素C检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，R1试剂配制：第一反应缓冲液为25‑75mM，反应增强剂为0.5%‑3%（w/v），第一防腐剂为0.1%‑0.5%（w/v），第一稳定剂，第一表面活性剂为0.1%‑2%（w/v）,R1试剂的PH值控制在7.0‑8.0；R2试剂配制：包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒为0.2%‑1%（w/v）,第二反应缓冲液为25‑75mM，第二防腐剂为0.1%‑0.5%（w/v），第二稳定剂，第二表面活性剂为0.1%‑2%（w/v），R2试剂的PH值控制在7.0‑8.0。本发明具有反应灵敏，稳定性好，抗体偶联效率高，且能维持抗体活性，适用于大批量试剂生产，并且操作方便适用全自动生化分析仪。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，尤其涉及一种胱抑素C检测试剂盒。

背景技术

CysC是一个含120个氨基酸残基的碱性非糖基化低分子量蛋白质，分子量为13359，等电点为9.3，为胱氨酸蛋白酶抑制因子。CysC是一种分泌性的蛋白质，在生理液中分布广泛，主要存在于人体的各种细胞外液中如脑脊液、血液、尿液、羊水、精液、胸腔液等。正常人脑脊液中的CysC浓度最高，尿中的浓度最低。CysC如其他的低分子量蛋白质一样可自由通过肾小球，几乎完全在近曲小管重吸收和分解。它在血清中的浓度主要与肾小球滤过率有关，是理想的评价肾小球滤过率的内源性生化标志物。

肾小球滤过率（GFR）是反映肾功能的一项重要指标。菊粉和51Cr-EDTA外源性标记物清除率被认为是评价GFR的理想方法，但菊粉清除率试验因操作繁琐等多种原因未能应用于临床，51Cr-EDTA清除率试验由于价格昂贵，具放射性，某些患者如孕妇不适用等也未得到广泛应用。临床上常采用测定内源性标志物如血尿素氮和血清肌酐评估GFR，虽应用较为广泛，但这些内源性标志物并不是理想的反映GFR的指标。胱抑素C可经肾小球自由滤过，在近端肾小管上皮细胞被完全分解代谢，不再重返血流，也不被肾小管上皮细胞分泌，肾脏是唯一清除循环中胱抑素C的器官，机体产生胱抑素C速率也相当恒定。因此，胱抑素C是较血清肌酐有更高的敏感性和特异性，较为理想的反映GFR的内源性标志物。

CysC属于小分子多肽，以抗原抗体反应为理论基础的各种免疫学检测方法均能对其进行检测，包括单向免疫扩散法（RID）、放射免疫测定法（RIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、荧光免疫测定法（FIA）、颗粒增强散射免疫比浊法（PENIA）、颗粒增强透射免疫比浊法（PETIA）和溶胶颗粒免疫分析（SPIA）。RID法精密度高，可靠性好但灵敏度差测定时间长，操作复杂，不利于临床操作。RIA法结果准确，但存在放射性污染，检测时间长，实际具有半衰期不易保存，操作不方便等缺点。FIA法灵敏度高，结果准确，测定快速，检测限低，但是所需设备昂贵，测定成本高，不利于临床推广。ELISA法费时费力，不适合于急诊测定。SPIA法监测速度快，变异系数小，但由于其检测限太高（1.5mg/L），限制了改方法的使用。

发明内容

本发明提出了一种胱抑素C检测试剂盒，以解决上述背景技术中提出的问题。

本发明提出了一种胱抑素C检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，

R1试剂配制：第一反应缓冲液为25-75mM，反应增强剂为0.5%-3%（w/v），第一防腐剂为0.1%-0.5%（w/v），第一稳定剂，第一表面活性剂为0.1%-2%（w/v）,R1试剂的PH值控制在7.0-8.0；

R2试剂配制：包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒为0.2%-1%（w/v）,第二反应缓冲液为25-75mM，第二防腐剂为0.1%-0.5%（w/v），第二稳定剂，第二表面活性剂为0.1%-2%（w/v），R2试剂的PH值控制在7.0-8.0。

优选的，所述第一反应缓冲液和第二反应缓冲液为PBS缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、MOPOS缓冲溶液、HEPES缓冲溶液中的一种或几种。