[发明专利]一种胱抑素C检测试剂盒

权利要求书

1.一种胱抑素C检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，其特征在于，R1试剂配制：第一反应缓冲液为25-75mM，反应增强剂为0.5%-3%（w/v），第一防腐剂为0.1%-0.5%（w/v），第一稳定剂，第一表面活性剂为0.1%-2%（w/v）,R1试剂的PH值控制在7.0-8.0；R2试剂配制：包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒为0.2%-1%（w/v）,第二反应缓冲液为25-75mM，第二防腐剂为0.1%-0.5%（w/v），第二稳定剂，第二表面活性剂为0.1%-2%（w/v），R2试剂的PH值控制在7.0-8.0。

2.根据权利要求1所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，所述第一反应缓冲液和第二反应缓冲液为PBS缓冲溶液、Tris-HCl缓冲溶液、MOPOS缓冲溶液、HEPES缓冲溶液中的一种或几种。

3.根据权利要求1所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，所述反应增强剂为PEG2000、PEG6000、PEG8000或PEG12000中的一种或几种。

4.根据权利要求1所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，所述第一防腐剂和第二防腐剂为Proclin-300、庆大霉素或NaN3中的一种。

5.根据权利要求1所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，所述第一稳定剂为EDTA-Na或NaCl和水配制而成；所述第二稳定剂为甘油、EDTA-Na、BSA、NaCl和水配制而成。

6.根据权利要求1所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，所述第一表面活性剂和第二表面活性剂为Tween20、TritonX-100或TergitolNP9中的一种或几种。

7.根据权利要求1-6所述的一种胱抑素C检测试剂盒，其特征在于，其原料配制如下：

R1试剂：缓冲液为50mMPBS，PEG8000为20g/L，NaN3为0.95g/L，NaCl为0.9g/L，Tween20为0.2%,R1试剂的PH值控制在7.0；

R2试剂配制：包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒为1%（w/v）,PBS缓冲液为50mM，NaN3为0.95g/L，甘油为1%，EDTA-Na为1.2%，BSA为1g/L，NaCl为2.9g/L，Tween20为0.2%，R2试剂的PH值控制在7.0。

8.一种根据权利要求1所述的包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、将羧基胶乳微球用50mmol/L（PH值为6.0）PBS缓冲液稀释至1%悬浮液（w/v）；

S2、在该悬浮液中加入适量EDC和NHS，搅拌混匀，室温反应15分钟；

S3、用50mmol/L（PH6.0）的PBS缓冲液洗涤羧基胶乳微球，除去未反应的NHS和EDC，并将胶乳微球在纯化水中悬浮，使其浓度为1%（w/v）；

S4、将cys-c抗体迅速加入胶乳悬浮液中，37摄氏度不断搅拌，反应3小时；

S5、将反应完成的胶乳抗体溶液连接上超滤膜系统，循环清洗，去除未结合的蛋白；

S6、清洗完毕后便得到了包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒。

9.一种根据权利要求8所述包被有胱抑素C抗体的胶乳颗粒的制备方法，其特征在于，所述S5中，超滤系统由反应釜，蠕动泵，超滤膜包组成，在大批量生产时将胶乳抗体溶液用蠕动泵泵入超滤膜包中进行循环清洗，同时将清洗废液另外收集排出，过程中不断补充缓冲液；超滤膜包采用切向流过滤原理，溶液切向流过膜表面，流体产生的跨膜压力将部分溶液压过滤膜，截留部分则在系统中循环回流，过滤的同时对膜进行冲刷，使膜表面不会形成凝胶层，保证了清洗效率，胶乳抗体溶液不会有损耗，免去了超速离心后再次悬浮清洗的繁琐，利于试剂的大批量生产。