[发明专利]一种同型半胱氨酸检测试剂盒在审
| 申请号: | 201810723602.8 | 申请日: | 2018-07-04 |
| 公开(公告)号: | CN109001462A | 公开(公告)日: | 2018-12-14 |
| 发明(设计)人: | 王贤理;池万余;王伊琳;邓慰;卢强 | 申请(专利权)人: | 浙江伊利康生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 325000 浙江省温*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 同型半胱氨酸 心血管疾病 检测试剂 缓冲液 胱硫醚 合成酶 心血管疾病危险因素 定量检测 辅助诊断 临床治疗 体外诊断 危险因子 分解酶 还原剂 人血清 试剂盒 丝氨酸 体外 制备 | ||
1.一种同型半胱氨酸检测试剂盒,包括试剂R1、试剂R2,其特征在于:试剂R1组分丝氨酸0.5-20mmol/L、HCY还原剂0.5-10mmol/L、NADH 0.5-1.8g/L、LDH 10-200KU/L、缓冲液20-100mmol/L;试剂R2组分为胱硫醚β-合成酶0.5-10KU/L、胱硫醚β-分解酶10-50KU/L、缓冲液20-100mmol/L。
2.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于,其使用方法:首先把结合或聚合状态的Hcy,包括复杂的二硫键的聚合状态的Hcy以及蛋白结合的Hcy还原成游离型的Hcy,然后游离型的Hcy与丝氨酸在胱硫醚合成酶(CBS)的作用下形成胱硫醚,形成的胱硫醚在胱硫醚裂解酶(CBL)的作用下形成Hcy、丙酮酸和氨,丙酮酸与NADH(辅酶)在乳酸脱氢酶(LDH)的作用下反应,NADH转化为NAD+在340nm下每分钟转化的速率直接与Hcy的浓度正相关。
3.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:缓冲液为Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液、PBS缓冲液、MOPS缓冲液中的一种或几种按任意比组成的混合物,缓冲液的PH值为7.1-7.5。
4.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:试剂R1和R2中还加入有电解质,电解质为氯化钠、氯化钾或氯化钙,电解质的质量百分比为0.2-2%。
5.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:试剂R1和R2中还加入有表面活性剂,表面活性剂选择Tween系列或聚氧乙烯苯基醚,表面活性剂的质量百分比为0.1-1.0%。
6.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:试剂R1和R2中还加入有防腐剂,防腐剂为为叠氮钠、proclin300、MIT、硫酸庆大霉素、硫柳汞中的一种或多种,防腐剂的浓度为0.1-0.5%(w/v)。
7.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:试剂R1和R2中还加入有稳定剂,稳定剂为BSA、蔗糖、山梨糖或海藻糖,稳定剂的浓度为2-5%(w/v)。
8.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于:试剂R1和R2中还加入有促凝剂,促凝剂是聚乙二醇6000,促凝剂浓度为0.1-1%(w/v)。
9.根据权利要求1所述的一种同型半胱氨酸检测试剂盒,其特征在于,HCY还原剂可以是三(2-羧乙基)膦盐酸盐(TCEP)、二硫苏糖醇(DTT)或β-巯基乙醇(β-ME)。
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