[发明专利]一种异嗜性小鼠白血病病毒的特异性引物及检测方法有效
| 申请号： | 201810720390.8 | 申请日： | 2018-07-02 |
| 公开（公告）号： | CN108531662B | 公开（公告）日： | 2022-04-08 |
| 发明（设计）人： | 闻洁 | 申请（专利权）人： | 苏州良辰生物医药科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12N15/11;C12R1/93 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人： | 汪青;周敏 |
| 地址： | 215613 江苏省苏州市张家*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 异嗜性 小鼠 白血病病毒 特异性 引物 检测 方法 | ||
1.一种异嗜性小鼠白血病病毒的特异性引物，其特征在于：所述的特异性引物包括逆向引物，所述的逆向引物为5’-CACTGGAGACCGAGGAATCAT-3’；所述的特异性引物还包括正向引物，所述的正向引物为5’-GACAGGACAAACAGCTAACGC-3’。
2.一种非疾病诊断目的的异嗜性小鼠白血病病毒的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）根据X-MuLV病毒基因组序列设计特异性引物，所述的特异性引物包括正向引物和逆向引物，所述的正向引物为5’-GACAGGACAAACAGCTAACGC-3’， 所述的逆向引物为5’-CACTGGAGACCGAGGAATCAT-3’；
（2）提取生物制品中的总RNA；
（3）根据步骤（1）设计逆向引物和步骤（2）提取的总RNA进行逆转录；
（4）以步骤（3）得到的逆转录产物为模板，以步骤（1）设计的正向引物和逆向引物进行PCR扩增；
（5）取步骤（4）得到的扩增产物进行凝胶电泳获得检测结果。
3.根据权利要求2所述的非疾病诊断目的的异嗜性小鼠白血病病毒的检测方法，其特征在于：所述的生物制品为重组融合类生物制品、单克隆抗体或生物组织提取制品。
4.根据权利要求2所述的非疾病诊断目的的异嗜性小鼠白血病病毒的检测方法，其特征在于：步骤（4）中进行所述的PCR扩增的扩增条件：94℃预变性5min；94℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，30个循环；72℃总延伸10min；4℃保存。
5.根据权利要求2所述的非疾病诊断目的的异嗜性小鼠白血病病毒的检测方法，其特征在于：所述的扩增产物的长度为345bp。
6.根据权利要求2所述的非疾病诊断目的的异嗜性小鼠白血病病毒的检测方法，其特征在于：所述的凝胶电泳采用琼脂糖凝胶电泳。
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