[发明专利]测定脂蛋白相关磷脂酶A2的免疫层析检测试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种测定脂蛋白相关磷脂酶A2的免疫层析检测试剂盒，由免疫层析试纸条和塑料外壳组成，所述免疫层析试纸条是由底板、样品垫、试剂垫、硝酸纤维素膜和吸收垫组成，所述样品垫、试剂垫、硝酸纤维素膜和吸收垫依次交错固定于所述底板上，其特征在于所述试剂垫包被有鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体标记的彩色荧光微球，硝酸纤维素膜上的检测线包被有鼠抗人Lp-PLA2单克隆抗体，质控线包被有山羊抗鼠多克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的一种一种测定脂蛋白相关磷脂酶A2的免疫层析检测试剂盒，其特征在于所述试剂垫的彩色荧光微球的直径范围是180-200nm；所述彩色荧光微球掺杂有稀土镧系元素，为铕(Eu)、钐(Sm)、铒(Er)、钕(Nd)中的任意一种或几种的混合物；所述彩色荧光微球掺杂的彩色染料含有氨基或者羟基官能团，为酸性紫1、酸性紫7、酸性蓝25、分散红58中的任意一种或几种的混合物。

3.根据权利要求1所述的一种测定脂蛋白相关磷脂酶A2的免疫层析检测试剂盒，其特征在于所述试剂垫上彩色微球标记的抗体来源于针对2个不同抗原表位的单克隆抗体细胞株，所述硝酸纤维素膜上的检测线包被的抗体来源于针对2个不同抗原表位的单克隆抗体细胞株。

4.一种如权利要求1-3中任意一项所述的测定脂蛋白相关磷脂酶A2的免疫层析检测试剂盒的制备方法，其特征在于4个针对不同抗原表位的细胞株采用如下步骤制得：

步骤1：单克隆抗体细胞株的获得：用Lp-PLA2蛋白免疫小鼠，采用标准的单克隆抗体制备方法制备特异性高亲和力的单克隆抗体细胞株，对所获得的单抗细胞株制备的抗体两两配对进行配对筛选，根据配对结果优选出用于试剂盒的4株单抗细胞株，其中2株用于检测，两株用于捕获；

步骤2：调整4株单抗细胞株制备的单克隆抗体的比例，优选出用于最终试剂盒制备的单抗混合物的比例；

步骤3：单克隆抗体的大量制备：采用标准的腹水生产工艺制备并纯化Lp-PLA2单克隆抗体，分装后保存于-20℃备用。