[发明专利]一种醒脑静注射液血液中冰片与麝香酮含量测定方法

权利要求书

1.一种醒脑静注射液在血液中的冰片与麝香酮含量测定方法，采用气质联用色谱法，其特征在于，所述方法步骤如下：

1)将醒脑静注射液静脉注射进入体内，在给药10min-60min采集血液样品，分离血浆，得供试品，备用；

2)将分离的血浆注入气质联用色谱仪，得到色谱图，根据色谱图，用标准曲线法计算血浆中冰片与麝香酮的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，气质联用色谱仪采用以下色谱条件：

气质联用色谱仪色谱系统条件：气相色谱：安捷伦7890A，色谱柱：岛津Rtx-Wax，30m，0.25ID，0.25um(RT-12423)，程序升温条件：初始温度150℃，15℃/min升温至250℃，维持5min，进样口温度：250℃，载气：高纯氦气，流速：2mL/min，压力：19.4psi，自动进样器：安捷伦7693；

自动进样器温度：室温，

保留时间：待测物 内标

冰片＝～5.3分钟 萘＝～5.6分钟

麝香酮＝～9.2分钟

运行时间：12.83min

进样量：1μL

质谱仪：7000QQQ-MS

离子化模式：电子电离

极性：正离子

监测模式：MRM

离子源温度：230℃

碰撞气：高纯氮气

EMV：2386或2441

离子对和参数：

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，所述标准曲线，以冰片和麝香酮作为检测目标，配制成已知的不同浓度的样品溶液，按照上述气质联用色谱仪色谱系统条件进行检测，得到色谱图，根据色谱图峰面积得到不同含量的冰片和麝香酮的标准曲线。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，根据需要，还要用到内标溶液，本发明用到的内标溶液是萘的溶液。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，冰片，麝香酮以及内标的峰面积和/或峰高由QQQ Quantitative Analysis软件获得，并用标准样品建立标准曲线。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，利用QQQ Quantitative Analysis软件对待测物/内标的峰面积比与待测物的浓度进行线性回归得到标准曲线，

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，得到色谱图后，进行数据处理，方法如下：待测样品浓度由QQQ Quantitative Analysis软件经线性方程式来确定，其他实验数据的统计分析利用Microsoft Excel软件计算。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，供试液的制备方法如下：动物或人静脉给药醒脑静注射液，剂量为5mL/kg，在给药后10min-60min时采集血液样品，采集量为5.0mL，转移至装有200μL 400U的肝素钠的离心管，混匀，将全血分到1.5毫升离心管，在4℃、转速10000g条件下，离心10分钟得到含药的血浆样本。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，空白液的制备方法如下：采集空白血液样品，采集量为5.0mL，转移至装有200μL 400U的肝素钠的离心管，混匀，将全血分到1.5毫升离心管，在4℃、转速10000g条件下，离心10分钟得到空白的血浆样本。

10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其中，制备标准曲线用的标准溶液的制备方法如下：

将冰片和麝香酮溶于无水乙醇，配制成5mg/mL的冰片和麝香酮的混合储备溶液，一份冰片和麝香酮储备液用无水乙醇进一步用稀释液稀释成1000，2,500，5,000，10,000，25,000，100,000，200,000和400,000ng/mL的标曲工作溶液，另一份冰片和麝香酮储备液用无水乙醇进一步用稀释液稀释成1,000，3,000，20,000和320,000ng/mL的定量下限、低、中、高浓度的质控样品工作溶液，

其中，制备标准曲线用的内标溶液的制备方法如下：

萘用无水乙醇制成10mg/mL的内标储备液，然后继续用乙酸乙酯稀释成600ng/mL的内标溶液，储备液检查时，将萘储备液用乙酸乙酯稀释成600ng/mL进行系统适应性检查。