[发明专利]一种在低氧条件下体外扩增人血管内皮祖细胞的方法在审

专利信息
申请号: 201810704920.X 申请日: 2018-07-02
公开(公告)号: CN108753688A 公开(公告)日: 2018-11-06
发明(设计)人: 陈镇洲;林依秋;刘兵;钟健;冯卓威 申请(专利权)人: 广州赛琅生物技术有限公司
主分类号: C12N5/071 分类号: C12N5/071
代理公司: 北京高沃律师事务所 11569 代理人: 刘奇
地址: 510000 广东省广州市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 低氧条件 差异表达基因 内皮祖细胞 基因表达 下体 人血管 外扩 有丝分裂细胞 骨髓微环境 细胞 差异表达 蛋白连接 低氧环境 分子水平 分子途径 缺氧条件 生物过程 脂肪酸 干细胞 酶活性 培养箱 人骨髓 原有的 低氧 泛素 干性 调控 基因
【权利要求书】:

1.一种在低氧条件下体外扩增人血管内皮祖细胞的方法,包括从人骨髓中分离出EPCs,并在低氧条件下于培养箱中培养。

2.根据权利要求1所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述低氧条件为1%O2的低氧条件。

3.根据权利要求1所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述培养EPCs的培养基为EGM-2培养基。

4.根据权利要求1所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述培养EPCs的时间为21天左右。

5.根据权利要求1所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述低氧条件对EPCs基因表达包括以下基因的差异表达:下调基因LOC102723946、C1QC、TYROBP、PNLIPRP3、MMP10、FOLR3、VSIG4、DCDC2C、F13A1、SERPINB4、IVL、ADORA3、LINC00520、LONRF3、EPHB1、FCGR3A、MRC1、LOC284561、PPM1L、TFEC、COBL、SIGLEC1、GPRC5C、POSTN、TFPI2、KYNU、PID1、PDK4、AKR1C2、FAM84A、GDF15、CXCL5、TFRC、IGFBP3;上调基因RP11-909M7.3、PAPL、PIK3R6、TCTEX1D1、PLK1、PIP、MVD、CDC20、CCNB1、PRKCDBP、HMGCS1、SCUBE3、UBE2C、EBP。

6.根据权利要求5所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述差异表达基因至少涉及以下生物过程:细胞对脂肪酸的反应、调节有丝分裂细胞周期转变的泛素-蛋白连接酶活性的正调控、乙酰辅酶A代谢过程以及调节有丝分裂的细胞周期相变。

7.根据权利要求5所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述差异表达基因的表达至少与KEGG途径相关:脂质代谢、p53信号传导途径、萜类和聚酮化合物代谢、补体和凝血级联和细菌(百日咳)。

8.根据权利要求5所述的扩增人血管内皮祖细胞的方法,其特征在于,所述差异表达基因的蛋白质相互作用网络中评分≥0.9的相互作用包括PLK1-CDC20,PLK1-CCNB1,CDC20-CCNB1,UBE2C-CDC20,MVD-HMGCS1,UBE2C-PLK1,CXCL5-ADORA3。

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