[发明专利]提高莱鲍迪苷A1G含量的结晶法、其产品及用途

权利要求书

1.一种纯化如下结构所示的化合物莱鲍迪苷A1G(RA1G)的方法，

所述方法包括：

(a)可选地，对包含RA1G的原料进行纯化前预处理；

(b)采用甲醇水溶液为溶剂，对经或未经预处理的包含RA1G的原料进行第一次结晶并进行固液分离；

(c)取前一次结晶所得固相，采用甲醇水溶液为溶剂溶解，并在适当条件下，进行第二次结晶得到纯化产物；

(d)可选地，对前次结晶得到的纯化产物重复结晶纯化一次或多次或采用其他纯化方式进行进一步纯化；

(e)可选地，将结晶纯化步骤中所余的液相循环利用到包含RA1G的原料的制备过程中。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述包含RA1G的原料采用酶催化法制得，所述酶催化法包括：

(1)提供莱鲍迪苷A和葡萄糖基供体；

(2)通过环糊精糖基转移酶和淀粉酶的催化产生莱鲍迪苷A1G。

3.如权利要求2所述的方法，其中，所述酶催化法包括选自下组的一种或多种条件：

所述莱鲍迪苷A为选自下组的一种或多种：存在于天然植物中的莱鲍迪苷A、提取的莱鲍迪苷A、合成的莱鲍迪苷A；

所述葡萄糖基供体为选自下组的一种或多种：淀粉，如可溶淀粉；糊精；麦芽糊精；α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精；麦芽糖；

所述环糊精糖基转移酶选自：α-环糊精糖基转移酶、β-环糊精糖基转移酶和γ-环糊精糖基转移酶；

所述淀粉酶为选自下组中的一种或多种：糖化酶、α-淀粉酶、β-淀粉酶；

所述环糊精糖基转移酶的用量为0.1～30kNU/L，例如0.5～20kNU/L，1～15kNU/L，或5000～50000U/mL，例如10000～40000U/mL，15000～35000U/mL；和/或所述淀粉酶的用量为30～300U/mL，例如50～250U/mL，80～220U/mL；和/或所述酶为固定化酶；

所述莱鲍迪苷A的起始浓度为5～200g/L，例如8～150g/L，10g～120g/L；所述葡萄糖基供体的起始浓度为10～800g/L，例如20～700g/L，30～600g/L，30～300g/L；

步骤(2)在水相体系中进行，例如在水(如纯水、蒸馏水、超纯水，pH 6)中进行；

步骤(2)的反应温度为35～90℃，如40～90℃，45～85℃，50～70℃，45～85℃；和/或

步骤(2)的反应时间为0.5～72小时，如1～48小时，1.5～36小时，5～20小时。

4.如权利要求1所述的方法，其中，步骤(a)的纯化前预处理包括选自下组的一个或多个处理：过滤、吸附和洗脱、浓缩和干燥，也可以采用其它方法如：溶剂沉淀法、微孔滤膜过滤法等去除小分子杂质(如残留的葡萄糖)。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述预处理通过如下一个或多个处理进行：

(a1)可选地，对包含莱鲍迪苷A1G的原料进行过滤，例如，采用滤板、滤纸、滤芯进行过滤，优选采用精细滤板，更优选孔径为5～10μm的精细滤板；

(a2)可选地，采用大孔树脂对包含莱鲍迪苷A1G的原料进行吸附，并对其进行洗脱，例如：

用苯乙烯类或丙烯酸酯类大孔吸附树脂进行吸附，例如孔径为6-15nm，比表面积为600-1300㎡/g的大孔吸附树脂；

用水(如2～10倍树脂体积的水)对吸附了原料的大孔树脂进行洗涤，例如以0.5-5BV/h的流速洗涤；

用乙醇洗脱剂对吸附在树脂上的物质进行洗脱，如可采用30～90％(v/v)(优选≥60％)的乙醇洗脱剂，体积为≥1.5倍，如1.5～4倍柱床体积；

(a3)可选地对原料、经过滤、和/或经吸附和洗脱的产物进行浓缩和/或干燥，如喷雾干燥、真空干燥，例如在-0.06～0.09MPa，60～85℃的条件下浓缩乙醇洗脱液，例如以65～90℃的出风温度进行喷雾干燥。